琼脂扩散实验
实验材料 待检血清
试剂、试剂盒 生理盐水琼脂粉
仪器、耗材 微量进样器打孔器玻璃板湿盒
实验步骤
1. 将适当稀释(事先滴定)的诊断血清与予溶化的2%琼脂在60℃水浴预热数分钟后等量混合均匀制成免疫琼脂板。
2. 在免疫琼脂板上按一定距离(1.2~1.5厘米)打孔,见图1。
1~5孔加参考血清,6~7孔加待检血清
3. 向孔内滴加1:2,1:4,1:8,1:16,1:32稀释的参考血清及1:10稀释的待检血清,每孔10微升,此时加入的抗原液面应与琼脂板一平,不得外溢。
4. 已经加样的免疫琼脂板置湿盒中37℃温箱扩散24小时。
5. 测定各孔形成的沉淀环直径(mm),用参考血清各稀释度测定值绘出标准曲线,再由标准曲线查出被检血清中免疫球蛋白的含量。
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