脑脊液的化学检验（二）

三、脑脊液蛋白电泳

1、原理  与血清蛋白电泳相同，利用各种蛋白质在电场作用下迁移率不同来进行检测。由于CSF蛋白质含量较低，电泳前须进行浓缩处理。一般采用透析法浓缩，将CSF加入透析袋内，置于吸水的透析液中，CSF中的水分移至透析液内，CSF的蛋白质浓度增加后，再进行电泳分析。

2、试剂与器材

（1）器材  透析膜可商品化购买，亦可用玻璃纸袋；电泳设备同血清蛋白电泳。

（2）试剂  透析液为聚乙二醇20000氯化钠溶液：称取聚乙二醇20000 30.0g，氯化钠0.9g，加90ml蒸馏水溶解，再加巴比妥缓冲液（pH8.6，0.05mol/L）10ml，混匀，溶液pH为7.4。透析液亦可用500g/L的右旋糖酐溶液。

3.方法先将CSF加入透析袋内，放入聚乙二醇20000氯化钠溶液中，室温透析6~7小时（如用500g/L的右旋糖酐溶液，透析2~4℃时需15小时），浓缩至0.05~0.1 ml即可。浓缩的脑脊液按血清蛋白电泳的方法进行电泳分析。

    正常脑脊液蛋白电泳带与血清蛋白电泳带有不同之处：脑脊液出现较多的前白蛋白而血清中较少；CSF的β-球蛋白略高于血清；γ-球蛋白仅为血清的一半。

4、正常参考值及临床意义

对于CSF蛋白电泳质与量的分析，在神经系统疾病诊断方面有一定的意义。见表3。  

另外，可根据CSF蛋白电泳结果计算蛋白商（protein quotient），其计算公式为：蛋白商=球蛋白/白蛋白。参考范围约为0.4~0.8。

蛋白商增高：提示球蛋白增高，见于脑脊髓膜炎、神经梅毒、多发性硬化征、亚急性梗塞性全脑膜炎等。

蛋白商降低：提示白蛋白增高，见于脊髓压迫症、脑瘤、化脓性脑膜炎的急性期等。

表3  脑脊液蛋白电泳参考值范围和临床意义

四、脑脊液肿瘤生化标志物检查

脑脊液中肿瘤标志物现已发现多种，包括癌胚抗原（CEA）、甲胎蛋白（AFP）、胶质瘤相关抗原、β₂-微球蛋白、绒毛膜促性腺激素（HCG）、铁蛋白（FP）及部分酶类如乳酸脱氢酶、基质金属蛋白酶等。

1、癌胚抗原（CEA）神经组织不表达CEA，CEA水平对于能产生CEA的肿瘤向中枢神经系统转移的监测是一个非常灵敏的指标。有人研究了204例各种神经系统疾病CEA水平，包括35例肿瘤。在35例肿瘤病人中，脑脊液CEA升高者10例，且这10例均是转移性癌。另一项研究表明，软脑膜癌CEA水平升高但除外淋巴瘤转移所致软脑膜癌。其特异性高达50%，但灵敏度只有31%。在怀疑脑转移性癌的病例中，脑脊液细胞学阴性，但对于能产生CEA的肿瘤如乳腺癌、结肠癌、胃癌、部分肺癌，脑脊液中CEA通常会升高，有诊断价值。

2、胶质瘤相关抗原  胶质瘤相关抗原有两种：一种是神经外胚层胶质瘤相关抗原（G-22），另一种是神经-红细胞生成素相关抗原。前者表达于肿瘤细胞及来源于神经嵴的正常细胞；后者存在于脑细胞及红细胞。有人采用固相放免技术分析了66例各种神经系统疾病，其中包括18例胶质瘤患者。结果发现18例胶质瘤患者G-22均呈阳性（大于10ng/ml）。30例非胶质瘤神经系统疾病患者G-22均是阴性。除了未成熟畸胎瘤、部分与中枢神经纤维瘤有关的脑膜癌，以及从肺转移而致的脑瘤外，绝大多数非胶质瘤脑瘤为阴性。G-22抗原水平与肿瘤大小及组织学类型均高度相关，因此监测脑脊液G-22抗原水平可以预报恶性胶质瘤的进展与消退。

3、AFP及HCG  AFP为一种糖蛋白，在卵黄囊中合成。脑脊液中AFP升高见于一些转移性胚胎细胞肿瘤。HCGβ亚单位升高见于转移性绒毛膜癌、胚胎细胞性睾丸癌、分泌促性腺激素的畸胎瘤累及中枢神经系统。β-HCG水平一般与治疗中肿瘤的增殖相关，并且β-HCG升高常常早于肿瘤转移的临床或放射学证据。

4、脑脊液铁蛋白（Ft）病毒性脑膜炎患儿CSF的铁蛋白约为正常对照组的3倍。若以3.2μg/L（ELISA法）为95%的对照人群的上限，CSF铁蛋白对病毒性脑膜炎诊断的灵敏度为66%，特异性为92%。中枢神经系统恶性肿瘤患者CSF铁蛋白的平均值为59.5μg/L（RIA法），明显高于正常对照组和良性肿瘤组。恶性胶质瘤患者铁蛋白水平（平均103.0μg/L）明显高于病毒性脑炎（5.4μg/L）和头痛患者（4.3μg/L）。伴有中枢神经系统浸润的急性淋巴细胞白血病患儿，其脑脊液铁蛋白可高达正常值的5倍，未累及中枢神经系统组和病毒性脑炎组基本正常。因此CSF的铁蛋白检查对恶性肿瘤的诊断和疗效评价具有重要意义。