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固体培养基的原理

2022.1.03

  固体培养基的凝固剂一般不是微生物的营养成分,只起固化作用。理想的凝固剂应具备以下条件:不会被微生物分解利用;不会因高温灭菌而受到破坏;在微生物生长的温度范围内保持固体状态;对微生物及操作人员均无毒害作用;透明度好、凝固力强;价格低廉,配制方便。常用的凝固剂是琼脂。琼脂的主要成分是硫酸半乳聚糖,绝大多数微生物都不能分解利用它。琼脂的熔点为96℃,凝固点为40℃,因此,在一般的培养条件下都呈固体状态,而且透明度强。正是这些优良特性,使琼脂取代了早期使用的明胶而成为常用的凝固剂。

  呈液体状态的培养基,叫液体培养基或培养液,发酵液。液体培养基因营养物质分布均匀,与菌体表面接触充分,还能大量溶解微生物的代谢产物等优点,广泛用于微生物的生理、代谢研究以及大规模的工业化生产中。

  半固体培养基是指在培养液中加入少量的凝固剂(如0.2%-0.5%的琼脂)而制成的培养基。这种培养基常用于观察细菌的运动、厌氧菌的分离和菌种鉴定等。

  理想的凝固剂应具备以下条件:①不被所培养的微生物分解利用;②在微生物生长的温度范围内保持固体状态,在培养嗜热细菌时,由于高温容易引起培养基液化,通常在培养基中适当增加凝固剂来解决这一问题;③凝固剂凝固点温度不能太低,否则将不利于微生物的生长;④凝固剂对所培养的微生物无毒害作用;⑤凝固剂在灭菌过程中不会被破坏;⑥透明度好,粘着力强;⑦配制方便且价格低廉。实验用的凝固剂有琼脂、明胶和硅胶,后者用于配制自养微生物的固体培养基。对其他多数微生物来讲,以琼脂最为合适,一般加入1.5—2.5%即可凝固成固体。此培养基可供分离、鉴定、活菌计数、菌种保藏等用。

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