结晶性取本品少许,依法检查(通则0981),应符合规定有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。临用新制,避光操作。溶剂乙腈-水(60:40)。供试品溶液取本品约20mg,精密称定,置100m棕色量瓶中,加溶剂溶解并稀释至刻度,摇匀对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置100m棕色量瓶中,用溶剂稀释至刻度,摇匀系统适用性溶液取放线菌素D对照品适量,加溶剂溶解并稀释制成每1ml中约含0.2mg的溶液。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6mm250mm,5μm或效能相当的色谱柱);以醋酸盐缓冲液(取醋酸钠2.72g与醋酸2ml,加水溶解并稀释至1000ml)-乙腈(51:49)为流动相A,以上述醋酸盐缓冲液-乙腈(20:80)为流动相B,按下表进行线性梯度洗脱;流速为每分钟1.5ml;检测波长为25nm;进样体积100l时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)56651000系统适用性要求系统适用性溶液色谱图应与标准图谱致,放线菌素D与杂质I间的分离度应符合规定。放线菌素D峰的保留时间约为30分钟测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的2倍(2.0%),各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的5倍(5.0%),小于对照溶液主峰面积0.05倍的峰忽略不计。干燥失重取本品,以五氧化二磷为干燥剂,在60℃减压干燥至恒重,减失重量不得过5.0%(通则0831)细菌内毒素取本品,加内毒素检查用水超声使溶解后依法检查(通则1143),每1mg放线菌素D中含内毒素的量应小于100EU。(供注射用)