如何做好全自动血球分析仪的质量控制
1 实验前的质量控制
1重视仪器的日常维护、保养,使仪器处在最佳工作状态。o上班前,下班后,首先要搞好室内卫生,进实验室要换鞋,无关人员不得进实验室,尽量减少灰尘的污染。?操作人员对仪器的说明书要仔细阅读,对仪器的原理、操作规程、使用注意事项、细胞分布直方图的意义、异常报警的含义、引起实验误差的因素及仪器维护等要有充分了解,业务知识要扎实,操作熟练,工作责任性强。?抗凝剂的选择也是一个十分重要的因素,不同的抗凝剂有不同的结果(表1)直接影响到仪器测定的结果。通过实验,肝素、双草酸盐、枸缘酸钠不能用于血球分析仪的抗凝剂。而EDTA-K2、EDTA-K3、EDTA-Na2做血球分析仪的抗凝剂是比较理想的,不影响白细胞数目及大小,对红细胞的形态也影响最小,而且可以抑制血小板的聚集。EDTA-Na2价格低廉,但其溶解度较低,不适用于小试管内做抗凝剂,因为小的试管不能充分混和,容易造成血液凝固(在大的试管内可以做血液分析仪的抗凝剂用)。EDTA-K2、EDTA-K3溶解度高,不会出现血液凝固,所以我们日常工作中适用EDTA-K2或ED-TA-K3做血球分析仪的抗凝剂,一般的用量为1.5～2mg抗凝剂可使1ml血液不凝固。?我们使用的采血容器都是真空采血系统,血和抗凝剂充分混和,血样无凝块,这样既可使血液分析达到自动化,又可进行质量控制和保证操作者的安全。通常在采血后4小时内检查结果。?所用的试剂必须合格,我们使用仪器配套的试剂,包括稀释液、溶血剂,清洗液等。如果使用国内生产的或自制的试剂,其电导率、渗透压、pH、直方图等主要技术指标也尽可能和进口配套试剂相同,才能保证仪器测定的准确性。
2 实验中的质量控制
每天仪器开机后,仪器进行自检,首先进行试剂空白计数,要求WBC=0、RBC=0、PLT<5×109/L、HB=0。正常时采用原厂配套的质控物进行测定,在质控范围内才能进行标本测定。血液分析仪质量控制程序见图1。我们购买原仪器厂或经国家批准的实验室的定值物,每天绘制常规工作质控图,监测工作质量。以测定结果为纵坐标,测定日期为横坐标,首先把纵坐标居中的位置定为靶值(T),从此点作出一条与横轴平行的直线称为靶值线。然后分别在纵轴上下定出允许误差的警告界限和最大允许限的上下四个点,再分别通过四个点作出四条平等于靶值线的直线,分别称为警告界限和最大允许界限。每天开机后,先测一次定值标本,要求全部定值物的值都应落在最大允许范围内,才能进行标本测定。有时我们采用每日上午取正常人标本一份,重复测定5次,取其均值为靶值,作为质控物。当测定到15～20份标本后,重复测定一次质控物与靶值相比较,并按下列规则决定是否失控:WBC±0.3×109/L、HB±2g/L、MCV±2fL、MCH±1.5pg、MCHC±1.5%。凡上下波动超过上述范围者为失控,本法较为简便易行。
3 实验后的质量控制
在前面工作基础上打出病人结果是否准确可信、有无堵孔、吸量准确否、仪器稀释度如何等,审查报告结果是十分重要的,判断是否需要重复检查或手工操作是质控的最后一关。1看图形、曲线形态的位置。看白细胞和血小板判断有无血小板凝块,看血小板图判断有无干扰、污染、红细胞破坏。o成批化验单看,当日病人标本的各项数值的均值应保持在一定的范围内。?看白细胞、红细胞、血小板三总数结合诊断,综合判断结果正误。三者都低是否因为吸量不足或稀释有误。微孔是血球分析仪的关键部分,也是最易发生堵孔故障的。当仪器半堵孔时,得出结果数值偏低很多,这种情况仪器无任何提示,微孔半堵情况完全靠操作者判定。?白细胞图与总数及分类值要对照分析,需要时标本可涂片镜检。?红细胞和血小板数对比,通过相互参比判断两值可信度:RBC高或正常,PLT低者可信;RBC、PLT都低可疑有堵孔;RBC低、PLT高或正常可疑看诊断。?各报告中异常指示我们均能解释,整张化验单与诊断对比要相符。细胞直方图既给临床提供诊断数据,也为操作者提供对仪器工作状态和实验结果是否可信的监控。必须在仔细分析直方图后确定是否需要显微镜的检查,再发出报告,这一点在细胞分类计数中更为重要。
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