1. 自由竣基的活化
聚酰胺小片在溶有 10 g/l 己二胺和 10 g/l 二环己基碳二亚胺的二氯甲醇溶液中于 10℃ 孵化 4 h。用二氯甲醇、丙酮和冰水各 10 ml 冲洗，除去自由乙二胺
在 10 ml 溶有 10 g/l 亚硝酸钠的 0.5 mol/L 盐酸中，0℃ 孵化 20 min 实现活化。其后，聚酰胺小片用 10 ml 冰的 1 mmol/L 盐酸冲洗。
2. 酶结合到有活性的聚酰胺上并储存
在冲洗聚酰胺小片之后，马上添加酶溶液（0.2～0.5 mg/ml 溶于 0.1 mol/L pH 7.5 的磷酸钾，小片必须完全沉浸在溶液中）在 4℃ 孵化 3 h。在玻璃料上用溶有 0.5 mol/L NaCl 的 0.1 mol/L pH 7.5 磷酸钾冲洗，除掉没有被固定的酶。其后，用 0.1 mol/L pH 7.5 的磷酸钾冲洗来降低髙盐的浓度。如果短期储存，固定了酶的小片保存在 4℃ pH 7.5 的 0.1 mol/L 磷酸钾中。如果长期储存，这些小片迅速用水冲和用空气干燥（这个过程对于很敏感的酶是不能承受的） 展开 | 
