小鼠神经干细胞的流式分析及收集
实验概要
小鼠神经干细胞的流式分析及收集
主要试剂
神经干细胞培养液
主要设备
流式细胞仪、移液枪、流式细胞管
实验步骤
(1)在上流式细胞仪器前轻轻混匀样品。为了分析和收集细胞,通过调整前向散射范围(FSC-A)和侧向散射范围(SSC-A)来调整细胞门以去除细胞碎片,留下需要的细胞;设置FSC-A和前向散射宽度(FSC-W)去除细胞团块。通过检测管中PI阳性细胞比例确定死亡细胞的比例。如果死亡细胞比例在可以接受的范围内,设置FSC-A和SSC-A去除细胞碎片。
(2)分离筛选CD133阳性细胞。把收集到的细胞直接转入流式细胞管中,加入1~2 mL神经干细胞培养液。
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