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小知识: pcr循环N次出现多少目的DNA?

2020.3.04

在PCR反应中,经过n次循环,理论上DNA链的数目扩增了2的n次方。

PCR的一个循环,一个DNA模板被复制为2个DNA片段,由于每个循环所产生的DNA片段即为下一个循环的模板,因此反应产量以指数形成增长。

但是这种是理想状况,而实际过程中,并不是每一次扩增所有的模板都会被引物结合上,总有一部分模板没有被引物结合,毕竟体外扩增引物的结合是靠热运动随机碰撞的嘛,而结合到引物的模板,在链延长的时候又可能中途停止,再加上模板的损耗,酶活性的不断降低,实际上每次增长的系数并不到2,当然也不可能小于1,不然就越来越少了。所以就用1+x来表示实际的扩增倍数,x受实验条件的影响,如:程序的设定,酶的质量,体系的配方等,X是0-1之间的一个小数。

PCR反应一般30-40次循环,DNA片段可放大数百万倍。

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