细胞计数原理
原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目即可换算出每mL细胞悬液中的细胞数量。
操作步骤：
1. 将计数板及盖玻片擦拭干净，并将盖玻片盖在计数板上。
2. 轻轻吹打细胞悬液，使细胞均匀分布。吸出少许细胞悬液滴在细胞入口，使细胞悬液充满盖玻片和计数板之间，静置1~2min，使细胞沉降。注意盖玻片下不要有气泡，也避免细胞悬液进入旁边的槽中。
3. 在显微镜下对A/B/C/D四个大格内的细胞进行计数，压在大格四周边线上的细胞只计数压在2条边线上的细胞（如右侧和下方）。若镜下有2个细胞组成的细胞团，则应按单个细胞计算；若细胞团数量较多，占细胞总量的10%左右，则说明细胞分散不好会导致计算不准确，需要重新制备细胞悬液。
4. 按公式计数细胞数量 细胞数/mL=四个大格内细胞总数×104/4
(每一个大格的体积为长1mm×宽1mm×高0.1mm=0.1mm3，1mL=1000 mm3，因此计算时需×104)
细胞活力检测
在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞，总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力。由组织中分离细胞一般要检查活力，以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用；复苏后的细胞也要检查活力，了解冻存和复苏的效果。细胞悬液制备后，zui常用活体染料台盼蓝对细胞染色，进行细胞计数。
正常细胞胞膜完整，台盼蓝不能透过活细胞正常完整的细胞膜，故活细胞不着色；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞胞膜通透性增加，台盼蓝能进入细胞内而使细胞着色（蓝色）。
操作步骤：
1. 配制4%台盼蓝母液：称取4g台盼蓝，加少量蒸馏水研磨，加双蒸水至100mL，用滤纸过滤，4℃保存。使用时用PBS稀释至0.4%。
2. 胰酶消化贴壁细胞，制备单细胞悬液，并作适当稀释（106 cells/mL）。
3. 取少量细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合，轻轻吹打混匀，染色2~3min。
4. 显微镜下观察，死细胞着浅蓝色并膨大，无光泽；活细胞保持正常形态，无色透明有光泽。若需计算活细胞率则将染色的细胞悬液滴入细胞计数板计数。
活细胞率（%）= 活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）×100%
注意事项：台盼蓝染细胞时，时间不宜过长。否则，部分活细胞也会着色，会干扰计数的准确性。
