病原微生物的采样原则

一 防护原则

采样中避免造成人员感染和样本污染非常重要。应把采集的样本视为具有感染性，需采用必要的防护措施，注意安全操作，安全地包装和运输。应具备急救包，以便在采样中意外泄露时使用，确保安全。

1、人员要求

从事高致病性病原检测样本采集的技术人员，必须经生物安全培训具备相应的实验技能。在样本采集过程中，采样人员应按照国家相关规定的防护措施进行安全防护（包括疫苗接种等）。

2、个人防护

采样时要穿工作服、戴手套、口罩和帽子；接触不同患者时不能重复使用手套，以免交叉感染；在使用或处理注射器、手术刀和其他锋利器械时，应避免割伤和造成手套的破损；采样中尽可能穿防护服，根据所估计的疫情级别，选择不同的防护服；消毒人员对污染区表面和溢出物进行消毒时，要穿戴防护服和厚橡胶手套；为避免吸入有高度传染力的病原，还需使用呼吸防护器面罩，护目镜等防护用品。

3、污染废弃物的处理

样本采集和处理过程中产生的医疗（实验）废物应置于防渗漏的专用包装器（袋）中；废弃的针头、玻璃试管、安瓿等利器必须放入符合要求的利器盒里，按规定进行销毁；污染的可废弃设备和材料应先消毒后废弃；污染的可再用设备或材料应先消毒后清洗；装有废弃物的包装容器（袋）必须采用防渗漏、防遗洒的周转箱安全运送。

4、样本容器

一个样本一个容器。容器要求防渗漏，最好使用符合国家规定的耐用塑料制品材料制作，能承受运送过程中可能发生的温度和压力变化。所有采样用具、容器均需严格灭菌，并以无菌操作采集样本，严格避免由于采样用具、容器均需严格灭菌，并以无菌操作采集样本，严格避免由于采样对检品所造成的新污染。样本运输过程中要求采取“A类”或“B 类”3 层包装系统，由内到外分别为主容器（样本盛装容器）、辅助容器（或称 2 级容器）和外包装（或称 3 级容器）。样本在设施内（单位内部）传递应当使用盒子等 2 级容器。

5、意外事件报告与处理

样本采集和处理过程中发生意外事件或事故应妥善处理，并按国家和/或地方规定的时限和程序及时报告，必要时采取有效措施预防和控制感染。高致病性病原微生物菌（毒）种或者样本在运输、储存中被盗、被抢、丢失、泄漏时，当事人或发现者应当采取必要的控制措施，并在 2h 内分别向相关单位及其主管部门报告。

二 采集原则

1、必要的沟通

由于不同实验室的检验程序、检测项目和检测方法都不尽相同，对样本种类及采集、运送要求也不完全一致。因此采样之前需要提前与专业实验室联系。

2、专业指导与支持

专业实验室在同意检测并落实好样本运送日期和时间后，要尽快制定具体的实验方案，提供必要的指导，提供器材和采样指南（根据样本类型），最好派出专业人员在现场进行采样指导。

3、现场采样

对于常规监测、诊断和突发事件应急处理，无论检测方法多么复杂，实验结果只与采集的样本质量有关。因此现场流行病工作者在遇到可能是病原微生物引起的急性事件时，应遵守下列 3 条采样原则。

1）即使没有理想的采样器材，也要尽快地获得生物样本（人体血液、尿液及其他临床样本）。

2）有效控制外界污染和干扰，必要时对采样器材可能存在的外来污染或干扰进行评估（随机挑选 1～2 个器皿，将其密封并随同样本一起保存和送检）；当采集 2 个以上样本时应采取措施防止交叉污染。

3）尽快并妥善保存（保温、冷藏或冷冻）样本，以防止病原微生物玖死亡或降解。

4、采样时间

用于分离培养微生物的样本，应尽可能在急性期和使用抗生素之前采集。若已使用抗生素，则需加入药物拮抗剂，如加入青霉素酶拮抗青霉素，氨苯甲酸拮抗磺胺等。用于微生物抗体检测的血液样本，应采集急性期和恢复期 2 份样本。对不同的疾病需要采集的样本种类、检测目的、采样时间及采样要求也不尽一致，需依据所检测微生物确定。用于病毒分离和病毒抗原检测的样本，应在发病初期和急性期采样，病毒分类样本最好在发病 1～2 天采取。

5、特殊样本采样要求

因棉拭子和木质拭子棒类材料中含有核酸扩增抑制剂，因此，采集用于检测核酸的样本，如采集咽拭子或肛拭子等时，不能使用这类材料，而应使用灭菌人造纤维拭子和塑料棒。

三 运输原则

1、了解最新运送要求

近年来，针对病原微生物菌（毒）种、样本的运输，国务院、卫生部以及各地方政府出台了一系列管理条例、管理规定和管理方法。因此，运送前应了解和查阅相关要求，或与专业实验室联系寻找相应的技术支持。

2、运送基本要求

在病原微生物样本运送过程中，应严防剧烈振动和日光直射，使其处于完全封闭状态（既可防止样本蒸发，气体交换和异物污染，又能保护工作人员和环境安全）。若专业实验室距离较远，或距样本检测的时间较长，建议样本采集后做适当预处理再运送。

3、运送生物安全要求

依据国际国内通用生物安全操作规程或相关规定如《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》、《疑似人感染高致病性禽流感/不明原因肺炎病例样本送检、接收、检测和结果报告反馈工作流程》（中疾控发[2005]526 号）等的相关内容执行。

4、样本标识

采集和运送样本的容器须有明确且牢固粘贴的标签，标明样本的种类、原始采样容器、样本性质、数量、运送人和接受人及其联系方式、包装日期、运输日期、统一的识别编号及病人姓名、检验目的、临床诊断等相关信息，以供检验者参考。在疾病暴发调查中，每个患者应使用惟一的统一编号，并能与个案调查的信息符合。接收样本的实验室也应记录接收日期和时间、接受样本者的姓名、样本性质和状态等。当样本无标示或信息不全或不符合要求时，检验人员有权向送样者索取，或有权拒绝接收样本。

5、运送温度与时间

在运送过程中，时间越短、温度越低，样本到达进的质量越好。因此，应综合考虑运送样本的时间长短、样本所处的贮存状态及运送方式等，选择运送的温度。注意全血/血细胞的样本不可冷冻运输。

四 贮存原则

1、基本要求

为防止蒸发和保证安全，样本应盛装在带螺旋盖的封闭容器中置冰箱内贮存，应根据样本的检验目的，进行适当的贮存。

2、严格管理

对样本贮存应严格管理，作好样本进出和储存的记录。对高致病性病原微生物菌（毒）种和样本应当设专库或者专柜单独储存，并制定严格的安全保管制度，建立档案并指定专人负责。