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液相色谱分离系统的构成与特点

2021.1.25

  液相色谱分离系统包括色谱柱、恒温器和连接管等部件。色谱柱是液相色谱仪的心脏部件,它包括柱管与固定相两部分。柱管材料有玻璃、不锈钢、铝、铜及内衬光滑的聚合材料的其他金属。玻璃管耐压有限,故金属管一般用内部抛光的不锈钢制成用的较多。

    色谱柱内径为2~6mm(常用的标准柱型内径为4.6或3.9mm),柱长为10~30cm,柱形多为直形,内部充满微粒固定相,填料颗粒度5~10um,柱效以理论塔板数计,为7000~10000。柱温一般为室温或接近室温。

    一般在分离柱前备有一个前置柱,其填充物和分离柱完全一样,使淋洗溶剂由于经过前置柱为其中固定相饱和,使它在流过分离柱时不再洗脱其中的固定相,保证分离柱的性能不受影响。柱子装填的好与坏对柱效影响很大。对于细粒度的填料一般采用匀浆填充法装柱,先将填料调成匀浆,然后在高压泵的作用下,快速将其压入装有洗脱液的色谱柱内,经重洗后,即可备用。

    在液相色谱中,分离柱的制备是一项技术要求非常高的工作,一般很少自行制备。其发展趋势是减小填料粒度及柱径和柱长,以提高分析速度和柱效。




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