丝裂霉素的检查和鉴别方法

鉴别

(1)取本品,加水溶解并稀释制成每1ml中含10gg的溶液,照紫外可见分光光度法(通则0401)测定,在217nm与365nm的波长处有最大吸收。(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集918图)一致

检查

结晶性取本品少许,依法检查(通则0981),应符合规定。酸碱度取本品,加水制成每1ml中含5mg的悬浮液,依法测定(通则0631),pH值应为5.5~7.5。有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液取本品适量,加甲醇溶解并稀释制成每lml中含2mg的溶液。对照溶液精密量取供试品溶液适量,用甲醇定量稀释制成每1ml中含10gg的溶液系统适用性溶液取肉桂酰胺对照品与丝裂霉素各适量,加甲醇溶解并稀释制成每1ml中分别约含0.08mg与2mg的混合溶液。白丝裂霉素定位溶液取丝裂霉素对照品5mg,加水loml,超声使溶解,加入0.01mol/L氢氧化钠溶液0.2ml,摇匀,在室温下放置10分钟色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂0.077%醋酸铵溶液-甲醇(80:20)为流动相A;以0.077%醋酸铵溶液-甲醇(50:50)为流动相B,按下表进行线性梯度洗脱;柱温为30℃;检测波长为254mm;进样体积5l时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)100100100100系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,丝裂霉素峰的保留时间约为21分钟,肉桂酰胺峰的相对保留时间约为1.3,丝裂霉素峰与肉桂酰胺峰间的分离度应大于15.0。测定法精密量取供试品溶液与对照溶液各5l,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,肉桂酰胺峰按校正后的峰面积(乘以校正因子0.35)计算,不得大于对照溶液主峰面积(0.5%),白丝裂霉素(相对保留时间约为0.5)峰面积不得大于对照溶液主峰面积(0.5%),其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积(0.5%),各杂质峰面积的和按校正后的峰面积计算不得大于对照溶液主峰面积的4倍(2.0%),小于对照溶液主峰面积0.1倍的峰忽略不计干燥失重取本品,以五氧化二磷为干燥剂,在60℃减压干燥至恒重,减失重量不得过2.0%(通则0831)。细菌内毒素取本品,依法检查(通则1143),每1mg丝裂霉素中含内毒素的量应小于10EU。(供注射用)