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人胃泌素 (Gastrin)ELISA 试剂盒​准备试剂收集及注意事项

2020.4.13

人胃泌素 (Gastrin)ELISA 试剂盒准备试剂与收集血样

  1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。

2. 标准品液配制:使用前加入1ml 蒸馏水 混匀,配成 4 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 4 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二 管 。如此反复作对倍稀释,从第七管 中吸出 500ul 弃去。第八管为空白对照。

3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。

4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)

检测程序

  1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。

2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。

3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。

4. 洗板:同前。

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。

6. 洗板:同前。

7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。

8. 每孔加入100ul 终止液混匀。

9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。

结果计算与判断

  1. 所有 OD 值都应减除空白值后再行计算。

2. 以标准品4000 、 20 00 、100 0 、500 、 250 、 125 、 62.5 、 0 pg /ml 为横坐标, OD 值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。

3. 根据样品 OD 值在该曲线图上查出相应 Gastrin 含量。

试剂盒性能

  1. 灵敏度 : *小的Gastrin 检测浓度小于 30 pg/ml。

2. 特异性: 可同时检测重组或天然的人 Gastrin 。 不与 人其它细胞因子有交叉反应。

3. 重复性:板内、板见变异系数均小于10%。

注意事项

  1. 以上标准孔及待 测 样品均建议做复孔,每次测定应同时 做 标准曲线。

2. 洗涤过程 很关键。洗涤不充分将导致精确度误差及 OD 值错误地升高。

3. 板条开封后剩余板条要再封好,保持 板条干燥 。

4. 本试剂盒宜置 4 o C冰箱保存。

5. 本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断!

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