前言

位置异构体是仅在官能基位置上有所不同的几种化合物。在包括反应监测、反应物定性等许多分析应用中，分离这些位置异构体是非常重要的。然而，由于不同位置异构体之间的物理性质仅有微小差异，因此较难将其分离。

二甲氧基苯甲酸(DMBA)共有六种位置异构体。若采用GC法对这些异构体进行分离，则在进行色谱分离之前，通常需要先进行衍生化反应。本研究显示了在4.5分钟内对全部六种DMBA位置异构体进行基线分离所产生的结果。可采用两步梯度色谱分离来缩短总分离时间。经证明，在进行分离时，必须在流动相中加入甲酸。

图1 六种二甲氧基苯甲酸位置异构体的UPC²/UV色谱图。蓝色的数字所标示的是甲氧基的位置。

仪器与试剂

系统： 配备光电二极管阵列(PDA)检测器的 ACQUITY UPC²™

样本： 六种DMBA位置异构体的混合物，各异构体均为0.2 mg/mL的异丙醇(IPA)溶液

色谱柱： 按照客户要求定制的ACQUITY UPLC^® BEH125 3.0 x 100 mm, 1.7微米

流动相A： CO₂

流动相B： 含0.2%甲酸的甲醇

冲洗溶剂： IPA

分离方法：

流速： 1.2 mL/min

UPC²™管理器： 2175 psi

柱温： 60 °C

进样量： 1.0微升

运行时间： 4.5分钟

检测波长： 240nm

数据管理： Empower^® 3软件

结论

超高效合相色谱(UltraPerformance Convergence Chromatography^TM)可在不进行样本衍生化的情况下，对六种DMBA位置异构体进行快速的基线分离。