光散射/纳米粒度仪：应用实验答疑解惑篇
不论对于何种类型的单位，科研院校，企事业单位，私营企业等等，良好的实验操作和日常维护习惯都至关重要，这将会极大延长仪器的使用寿命，减少耗材支出和降低异常故障风险。用一句话总结：把公共仪器当成自己珍惜的事物去爱护，培养责任心是很重要的。
如果你还没有阅读之前的文章，没关系，点击下方链接即可：
激光衍射法/动态光散射法-激光粒度仪，使用操作及维护注意事项
OK，在本篇文章中，我们将针对动态光散射粒度仪（纳米测量粒度仪）进行一些扩展实验的答疑解惑，希望可以对你的应用实验有所帮助。
声明：此文章仅代表个人经验的总结，仅作为参考。
问题一：
关于测量结果中光强分布（Intensity distribution），体积分布（Volume distribution）和数量分布（Number distribution）的换算问题
解答：
首先要明确的是，我们直接测定得到的平均粒径z-average和分布结果（distribution）是基于散射光强分布，并且可以通过软件转化为体积分布（体积分布等同于质量分布）和数量分布，转化的前提是，我们要尽量基于以下三个前提：
– 所有的粒子都是球型的（或类球型）
– 所有的粒子都是均匀的，且密度相同
– 光学性质已知（粒子的折光指数，吸收率）
第三条前提是最重要的，因为体积和数量分布都是基于米氏理论（我们激光衍射法粒度仪中介绍过）换算过来的，因此这里我们需要较准确的输入待测粒子的折光指数（折射率）和吸收率。
由于前提条件是密度相同，因此，换算的体积分布就约等于质量分布。
如果你的纳米分散体系，不满足以上三个换算条件中的一个或多个，你会发现依然可以将结果或分布图换算为体积或数量分布，但此时我们建议你最好使用光强分布去表征你的样品。
通常当你的分散体系均大体满足上述三个条件的话，你会发现体积分布（≈质量分布）和强度分布的平均粒径大致相同，但数量分布的平均粒径会与它们大相径庭。
问题二：
如何测定等电点？
解答：
所谓的等电点，是zeta电位测定时的一个名词，正确解释应为当zeta电位为0时当前胶体体系的PH值，而非PH值为7时，当前胶体体系的ZETA电位，这点一定要注意。
如何测定呢？
1.当你只购买了标准配置的nano系列主机时，也可以通过手动方法测定等电点：
（1）准备好当前胶体体系样品，先通过其它设备（PH计）测定当前样品PH值，建议重复三次以上并取平均值；
（2）在nano系列主机中测定当前样品的zeta电位值，建议重复三次以上并取平均值；
（3）根据原始样品的zeta电位值的正负±，建议选用0.25mol/L的盐酸和氢氧化钠溶液开始相应方向的滴定，如果初始zeta电位值为正，则用0.25mol/L氢氧化钠溶液滴定（反之亦然）；
（4）每次滴定后，重新测定该样品的zeta电位值（循环往复这个步骤）；
（5）以横坐标为PH值，纵坐标为zeta电位值作图，在图上标出每个阶段样品的数值并连线（滴定间隔点越小越好）；
（6）在标出样品zeta电位为0前后位置的点后（比如+0.5mV,-0.4mV），将这两点连线，延长纵坐标zeta电位为0mV的连线，与曲线的交点，其对应的横坐标就是该样品的等电点。
2.上述的方法还是比较复杂的，如果有足够的预算，也可以建议购买与nano系列主机配套的自动滴定模块，机器可以自动控制进行zeta电位测定，酸碱滴定，以及等电点的自动绘图与测定。
问题三：
如何全面表述zeta电位的结果？
解答：
这个问题如何理解？很多用户朋友们，尤其是科研院校，在课题实验和论文中，一般只简单标明，该样品的zeta电位为**mV。这种表述没有问题，但不够全面，还记得zeta电位的三个影响因素吗？
– pH 的变化
– 溶液电导率的变化
– 某种特殊添加剂的浓度,如表面活性剂,高分子
其中首要的是PH，如果不考虑PH值，而判定zeta电位的结果，这样是不严谨的。同样，溶液的电导率，以及胶体体系中是否含有一些其它高分子溶液，或表面活性剂溶液，都会改变或影响样品的zeta电位值。因此，这里作者建议你，在表述样品的zeta电位值时，最好采用如下表述：
当前样品，在PH为**，溶液电导率为**ms/cm，（存在混合**浓度的表面活性剂下），zeta电位为**mV
还有用户询问，如何考量PH值，电导率，以及加入的表面活性剂对样品zeta电位值的影响呢？
其实很简单，一般实验的基本思路是保持其它参数不变，而只改变其中一个影响因素。
例如，我们可以尽量保持PH值不变的情况下，改变加入样品中的表面活性剂浓度，这样我们就可以考量表面活性剂浓度对样品zeta电位的影响。
1.粒径测量：
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使用disposable的塑料样品池测量粒径：
# 一定要注意由于是塑料材质，测试温度不能太高，一般是常温测试；
# 样品为水相（有机相会溶胀塑料）；
# 尽量避免灰尘和杂质的影响：操作时戴手套，不要触摸样品池底部，样品池外侧保持清洁和干燥，样品池内侧建议依次用纯水——水相样品润洗，样品或所用的分散剂最好过膜（水相0.2um或0.45um滤膜），进样时注意倾斜置入样品，并注意进样高度。准备好样品后，记得盖上配套的盖子（防尘，防止挥发）；
# 一句话总结，样品池外侧必须保持无污物，完全干燥，样品池内侧保证无肉眼可见的灰尘，气泡和杂质。
disposable的塑料样品池，测试样品后的清洁方式：不要整体置入超声水浴中清洗，用纯水多次清洗样品池内侧，最后一遍用无水乙醇清洗并排掉，然后样品池常温风干即可。
disposable的塑料样品池不推荐重复使用太多次，当无法彻底清洗或表面有划痕时应弃置掉。
使用玻璃或石英样品池测量粒径：
# 由于是玻璃或石英材质，测试温度可以比塑料样品池温度高，但要注意在测试温度较高时，除了本身的配套盖子以外，还需要盖上隔热盖（黑色方形）
# 样品为水相或有机相均可，如果使用玻璃样品池，要特别注意不能加入会腐蚀玻璃的样品（比如强碱性样品）；
# 尽量避免灰尘和杂质的影响：操作时戴手套，不要触摸样品池底部，样品池外侧保持清洁和干燥，样品池内侧建议依次用相应分散剂--样品润洗，样品或所用的分散剂最好过膜（0.2um或0.45um滤膜），进样时注意倾斜置入样品，并注意进样高度。准备好样品后，记得盖上配套的盖子（防尘，防止挥发）；
# 一句话总结，样品池外侧必须保持无污物，完全干燥，样品池内侧保证无肉眼可见的灰尘，气泡和杂质。
玻璃或石英样品池，样品测试后的清洁方式：不要整体置入超声水浴中清洗，用相应的分散剂多次清洗样品池内侧，最后两至三遍用无水乙醇清洗并排掉，然后样品池常温风干即可。
玻璃或石英样品池是可以多次重复使用的，但要记得谨慎清洗，不要划伤和污染内外表面。
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2.zeta电位测量：
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使用disposable的塑料U型样品池测量zeta电位：
# 一定要注意由于是塑料材质，温度不能太高，一般是常温测试；
# 样品为水相（有机相会溶胀塑料）；
# 尽量避免灰尘和杂质的影响：操作时戴手套，不要触摸样品池底部，样品池外侧保持清洁和干燥，样品池内侧建议依次用纯水——水相样品润洗，按照正规的进样方式进样，用注射器进行进样，注意观察在U型样品池内部不能有明显气泡和杂质。准备好样品后，记得在两端塞上配套的塞子（防尘，防止挥发），同时再次检查样品池表面，尤其是两端电极必须保持完全干燥；
# 一句话总结，样品池外侧（尤其两端电极处）必须保持无污物，完全干燥，样品池内侧保证无肉眼可见的灰尘，气泡和杂质。
使用disposable的塑料U型样品池，进行样品测试后的清洁方式：不要整体置入超声水浴中清洗，用新注射器（去针头）装纯水注入样品池进行多次清洗并排掉，最后一遍用无水乙醇注入清洗并排掉，然后样品池常温风干即可。
disposable的塑料样品池不推荐重复使用太多次，当无法彻底清洗或表面有划痕时应弃置掉。
使用dip-cell插入式样品池测量zeta电位：
# dip-cell专用样品池为玻璃材质，所以样品可以为有机相或水相。但建议每次实验尽量用同一类型的样品，同一个dip-cell专用样品池不要有机相和水相混用；
# 尽量避免灰尘和杂质的影响：操作时戴手套，不要触摸样品池底部，样品池外侧保持清洁和干燥，样品池内侧建议依次用相应分散剂——样品润洗，按照dip-cell的进样方式进样（具体操作查看相应操作手册），这里无需用注射器进样，但要注意液位高度，最后再次检查dip-cell专用样品池表面，必须保持完全干燥；
# 一句话总结，dip-cell专用样品池外侧必须保持无污物，完全干燥，样品池内侧保证无肉眼可见的灰尘，气泡和杂质。
使用dip-cell插入式样品池，样品测试后的清洁方式：不要整体置入超声水浴中清洗。用相应的分散剂多次清洗dip-cell专用样品池内侧以及dip-cell的电极处，最后两至三遍用无水乙醇清洗并排掉，然后常温风干即可。
dip-cell的上下两部分都可以多次重复使用的，但要记得谨慎清洗，不要划伤和污染dip-cell专用样品池的内外表面以及dip-cell电极。也不建议同一个dip-cell专用样品池有机相和水相混用。
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至此，这篇文章接近尾声了，笔者会不定期的进行总结和更新，希望这些解答可以帮助你更好地进行实验工作，欢迎留下宝贵的意见和建议。
