光合作用的一个突出特点是对植物自身生理状态和外界环境条件的变化高度敏感。这一特点，决定了测定方法的复杂性、多样性和灵活性，也决定了测定结果的多变性以及解释这些结果时了解植物状态、测定条件、环境条件、背景知识和研究经验的重要性。

　　测定时间在田间测定时，不仅要选择无云或少云的晴天，以便保证在太阳光强相对稳定的条件下进行，而且要注意选择合适的日时段。众所周知，在晴天，光强和温度等环境条件从早到晚都呈现规律性变化，上午逐渐增高，中午达到最高值，然后逐渐降低。叶片的光合作用速率也发生类似的变化。光合速率之所以在中午前后才达到最高值，一是因为上午早些时候光强和温度比较低，二是因为光合作用还处在逐步增高的光合诱导期中。因此，在作不同处理或品种的对比测定时，一定要在光合作用的诱导期结束、光合作用达到稳态之后进行，否则会得到不可靠、不可比、甚至错误的结果。为了避免可能发生的中午光合作用明显降低(“午睡”或“午休”，Xu 和 Shen 2005)对测定结果可比性的影响，以在10:00~12:00 和14:00~16:00 之间进行测定较为适宜。除了光合作用日变化的观测以外，过早开始和过晚结束测定，都不合适。为了尽量缩小测定期间环境条件变化的影响，比较类实验的测定时间要尽量短，处理或品种的数目要尽可能少，最好相互交替进行(许大全 2002)，以便避免较长时间内环境因素变化对测定结果可比性产生的不良影响。在较长时间阴雨天之后，叶片的光合活力往往很低，不宜在转晴后立即测定。至少在转晴半天或 1 d 后开始测定。有研究表明，前几天的天气不同(阴雨或晴天)，所得观测结果也不同(Yong 等2006)。特别是在观测叶片光合作用的发育变化或季节变化时，更要注意这一点。观测叶片发育期间光合作用的变化，最好在环境因素可控制的条件下例如人工气候室内进行, 以便避免环境因素变化的干扰。