粒系、红系祖细胞体外培养
【参考值】
粒系祖细胞体外琼脂培养：
正常骨髓：细胞丛与集落数之比为5～20：1CFU-C 约为50～70/105有核细胞。CFU-C浓度约为骨髓的1/10。CFU-E 为66/105有核细胞：
BFU-E
正常外周血：
集落的产率影响因素很多，各实验室报告均不一致，所以各实验室应建立自己的参考值。
【临床意义】
一般认为造血干细胞是一类特殊组织中的原始细胞，依靠这类细胞的增殖分化，而不是依靠机体的其它组织所提供的细胞来维持这类组织的功能和恒定的细胞群或恒定的细胞数量。从
目前用于造血干细胞的研究方法主要有：脾结节测定法、体外琼脂培养法、体内扩散盒琼脂培养法，扩散盒造血干细胞测定法、促红细胞生成素（
骨髓在体外琼脂培养中，当在培养体系中加入一定量的细胞团生成刺激因子或称集落刺激因子（
在醋酸地依红染色中，在低倍镜下见到集落有三种类型：
致密型（
混合型（
疏散型（
自从骨髓细胞在
造血干细胞与临床血液疾患的关系极为密切，已有许多资料证明，大多数再生障碍性贫血是由于造血干细胞数量的减少或质量异常所致，少数可能由于造血环境或免疫异常引起。白血病则认为是干细胞的癌变，导致其分化与增殖失去平衡，增殖减慢，成熟受阻
几种血液疾患造血干细胞的改变（表
表
为13/105有核细胞BFU-E 为2～38/105有核细胞1961年发现脾结节生成的实验技术后，造血干细胞的研究得到了进一步发展。1965年以后又相继地出现了骨髓细胞体外琼脂培养等技术，为深入研究和认识造血干细胞的增殖和分化特性，以及造血干细胞群中多向性造血干细胞与各类定向祖细胞之间的相互关系提供了重要的研究手段。EP）反应细胞测定法，体外血浆凝块培养等。Colony stimulation factor CSF）后，一般经过7天培养后，可以生成由粒细胞、单核—巨噬细胞或两者混合组成的细胞团，在琼脂培养中每生成的一个细胞团称为一个细胞团生成单位（Colony forming unit-calture,CFU-C）。在琼脂培养中，50个以上细胞聚集在一起称为集落，3-49个细胞聚集在一起称为丛（Claster）。Colse type）:主要由不同发育阶段的粒细胞系统的细胞组成。 Mixed type）：细胞团的中央为密集的粒细胞，周围环境疏散分布的单核—巨噬细胞。 Loose type）：主要由单核—巨噬细胞组成。 CSF作用下可以在体外琼脂培养体系中生成由粒细胞和单核—巨噬细胞组成的细胞集落后，1971年发现造血细胞在体外血浆凝块培养中，在培养体系中加入适量促红细胞生成素（EP）的条件下，经过短期培养后生成了由红系细胞组成的细胞团或称集落，为了区别于粒细胞组成的细胞团（CFU-C或CFU-C）将红系细胞组成的细胞团称为CFU-E（Colony Forming Unit Respondstoerythropoietin）。 。急性粒细胞性白血病患者，体外研究发现CFU-C增殖异常，特点是集落生成少或无，但有大量细胞丛生成，集落和丛由原始、幼稚和成熟缺陷的粒细胞组成。还有大量的残存的单个原始细胞散在琼脂中，在白血病治疗前呈“非白血病型生长（集落生成减低或不生长）”与呈“非白血病型生长（有小丛和大丛或残存原始细胞）”相比，前者的完全缓解率比后者为高。在诱导缓解期琼脂培养出现正常集落者，予示将会得到缓解。因此CFU-C体外琼脂培养对估计急性粒细胞白血病的预后和指导治疗具有一定意义。在对MDS研究中，发现多数造血组织增生征患者的血清和尿中CSF水平增高，如果出现“白血病型生长”集落，多数患者会在10个月内发生白血病。阵发性睡眠性血红蛋白症、真性红细胞增多症等也是造血干细胞异常的疾病，因此深入研究造血干细胞的生长特性及增殖分化的调节和控制已成为当前血液学研究中一个活跃领域。测定正常及各种血液疾患的骨髓和外周血中CFU-C、CFU-E、BFU-E等的变化可为血液疾患的治疗预后提供有用帮助，对于预测骨髓移植后的恢复状况，评价化疗药物对正常细胞的影响以及深入认识发病原理等都有一定的价值。2-2）2-2 几种血液疾患造血干细胞的改变
CFUc | CFUe | |
急性粒细胞白血病 | 显著减少或消失 | 显著减少或消失 |
急性粒细胞白血病（ CR） | 正常 | 正常 |
急性淋巴细胞白血病 | 显著减少或消失 | 显著减少或消失 |
慢性粒细胞白血病 | 增加 | 正常 |
慢性粒细胞白血病急变 | 显著减少 | 减少 |
红白血病 | 减少 | 减少 |
白血病前期 | 显著减少 | 无一定倾向 |
再生障碍性贫血 | 减少 | 减少 |
缺铁性贫血 | 正常或增加 | 正常？减少？ |
巨幼细胞贫血 | 正常或增加 | — |
阵发性睡眠性血红蛋白尿 | 显著减少，亦可正常 | — |
真性红细胞增多症 | 增加 | 增加？ |
多发性骨髓瘤 | 显著减少 | |
骨髓纤维化 | 显著减少 |
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