杆状病毒表达系统用于表达多个非融合蛋白的转染载体

　　这种载体的主要特征是含有2个或2个以上相同的启动子，可表达2条或2条以上多肽链的蛋白。

　　如Emery和Bishop[8]等构建的pAcVC2转染质粒，含有两个方向相反的多角体基因启动子。重组病毒可同时表达多角体蛋白和淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒（LCMV） N蛋白。Takehara[9]等构建了可插入两种外源基因的双重表达载体。该类载体也是利用两个相同的多角体基因启动子，使获得的重组病毒同时表达两种产物。Takehara等因此成功地表达了HBVsAg和HBeAg。

　　利用重组转染载体与野生型AcNPV DNA共转染细胞后获得重组病毒的频率是非常低的，通常只有0.2%～

　　5%[10]。这样就为筛选重组病毒的工作困难，为了提高重组效率，研究者们进行了一些探索：

　　（1）线性化AcNPV DNA：Kitts等[11]首先提出了将AcNPV DNA进行线性化处理。因为线性化的AcNPV DNA感染宿主细胞的能力很低，当与重组转移质粒发生同源重组后，原来线状的 AcNPV DNA即可自身环化，感染细胞的能力恢复，因此感染昆虫细胞的病毒绝大多数为重组病毒，这样使重组频率可提高到30%；

　　（2）致死缺陷型病毒：由Pharmingen公司[10]推出的BaculoGoldTM系统就是一个含致死缺陷型的线性AcNPV DNA。这种系统的DNA在多角体蛋白基因下游1.7 kb范围内的一段复制必需基因被去除，致使这种DNA转染包装细胞后不能复制成成熟的病毒粒子。当把重组转染质粒与其转染昆虫细胞后，外源基因修复了缺失部分，病毒被复活可形成具有感染能力的病毒体，再感染其它的昆虫细胞。这种DNA与转染质粒的重组效率可提高到85%～99%。