比较疏水作用层析与反向液相色谱分离疏水性蛋白质
疏水作用色谱是根据分子表面疏水性的差异,分离蛋白质、多肽等生物大分子的常用方法。疏水基团经常暴露在蛋白质、多肽等生物大分子的表面。我们称这些疏水基团为疏水斑块。疏水性斑块可以与疏水性色谱介质发生疏水性相互作用由于不同分子的疏水性不同它们与疏水色谱介质之间的疏水力是不同的疏水作用色谱是基于这一原理分离和纯化蛋白质和多肽等生物大分子。
反向液相色谱rpc
通常使用非极性固定相(如C18和C8)。流动相为水或缓冲液,常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等溶于水的有机溶剂来调节保留时间它是在被测组分离子与离子对试剂离子之间形成中性离子对化合物的基础上使其在非极性固定相中的溶解度增加从而提高了分离效果。
疏水作用层析:溶液配置简单,性状温和,能保持蛋白活性,但操作复杂,分离效率低
反向液相色谱:洗脱液要求高,蛋白变性,操作简单,分离效率高
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