冷冻切片机的基本操作、维修保养及技术实验

冷冻切片机的基本操作：

  1.在使用前2小时开启电源，并将温度设定在-25℃;

  2.将适当大小和厚度的标本放在蘑菇状杯上，加上冷冻蜡，夹在切片机的固定槽内;

  3.准备好玻片，选择切片厚度，摇动手柄，即可做成切片;

  4.将做成的切片小心的吸附在玻璃片上;

  5.使用结束后关闭电源,清洁腔体和擦干水气, 做好使用记录。

  6.为让水蒸气蒸发，请不要马上关闭切片机的上盖移门，应到第二天再关。如需详细说明，请借阅说明书。

冷冻切片机的维修与保养：

冷冻切片机是医院病理科必备的设备，用于手术中提取组织的快速冷冻切片，为手术提供病理依据。冷冻切片机的制冷温度在-30℃以下，加半导体制冷台，可使温度达到-50℃。各种品牌设备的工作原理基本一致，下面以山顿620E型冷冻切片机为例，结合几种故障介绍其维修保养方法。

故障一： 摇柄与进刀位置不对应，原因：机械传动部分错位，维修方法：调整对应位置后再安装皮带并拧紧定位卡，在运动摩擦部位加机油润滑。

故障二： 冷台温度显示错误代码F13、F7操作失灵，原因：冷台温度传感器失效。此传感器为负温度系数热敏电阻，25℃时电阻约为6kΩ，应急使用时可在P5插口上串10K电位器将冷台显示温度调成-40℃，或者直接拔去P5插头。除冷台温度显示“—”外，其他一切正常，不影响使用。

故障三： 制冷效果降低，原因有二：一是冷凝散热器散热不良，二是蒸发器结霜严重。处理方法：一是清洁散热器，可用水冲洗；二是除霜，每停机除霜一次，特别是夏季湿度温度较高极易结霜尽量减少开门次数。

故障四： 不制冷，该机使用的制冷剂为R502，极易挥发，若制冷系统漏气R502会在几天内全部挥发，注意避免使用有腐蚀性的消毒剂清洁机器和消毒房间。制冷系统检查补漏后加制冷剂R502约600g，压缩机工作时显示高压8.5kg/cm²，低压0.1kg/cm²。

冷冻切片实验目的：

  1 掌握冷冻切片的方法

  2 掌握冷冻切片的用途

  实验原理

  冷冻切片是借助低温使组织冻结达到一定的硬度并通过冰起支撑作用来进行切片的一种方法。

  速冻 可减小冰晶直径，避免组织细胞损伤。

  制冷 压缩机佛里昂制冷、半导体温差电制冷

实验材料

  新鲜动物肝脏

  实验方法

  1 准备  将仪器打开，样品台温度调至-40 ℃。

  2 取材   组织必须新鲜，尽可能不经水洗。取材时应避免组织挤压，防止人为假象 。样品大小5X5X3mm。

  3  速冻   将样品放在样品台上，样品四周加水加固，冷冻5－10min.

  4  切片  升高温度至-15℃（视样品而定），约5min后开始切片，厚度6-15um。

  5  制片  将切片直接放在载波片上或先放在盛水（固定液）的培养皿中再转移到载波片上。

  6  染色观察  吸干水，加一滴苏木精，加盖玻片，用显微镜观察。

  7  记录  将观察的结果绘于实验报告上，整理自己用过的物品。

  附：切片温度的设定

  脑    -12℃

  肝脏   -14℃

  肾脏   -16℃

  肌肉   -20℃

  皮肤  -25℃

  多脂肪组织   -30℃

  经过固定的组织   -5℃ ～-10℃

  附：快速永久制片

  1 固定 70％乙醇5～10min；

  2 水洗 2min；

  3 苏木精染色 5～10min；

  4 脱色  0.1%HCl 至变红；

  5 蓝化0.1NaOH 变蓝；

  6 水洗  5～10s ；

  7 脱水 70% 2min ；

  8 伊红染色 5～10min ；

  9 脱水 100%乙醇2minX2；

  10 透明 二甲苯 3min；

  11 封片  中性树胶封片。