高效毛细管电泳（high performance capillaryelectrophoresis，HPCE）是近年来开展起来的一种别离、剖析技术，它是凝胶电泳技术的开展，是高效液相色谱剖析的补充。该技术可剖析的成分小至有机离子、大至生物大分子如蛋白质、核酸等。可用于剖析多种体液样本如血清或血浆、尿、脑脊液及唾液等，HPLC剖析高效、快速、微量。

　　电泳迁移

　　不同分子所带电荷性质、几不同，外形、大小各异。一定电解质及PH的缓冲液或其它溶液内，受电场作用，样本中各组分按一定速度迁移，从而构成电泳。

　　电泳迁移速度(v)可用下式表示：

　　v=uE

　　其中E为电场强度(E＝V/L，V为电压，L为毛细管总长度)。u为电泳淌度。

　　电渗迁移

　　电渗迁移指在电场作用下溶液相关于带电管壁挪动的现象。特殊构造的熔合硅毛细管管壁通常在水溶液中带负电荷，在电压作用下溶液整体向负极挪动，构成电渗流。带电微粒在毛细管内实践挪动的速度为电泳流和电渗流的矢量和。

　　别离剖析类型

　　依据其别离样本的原理设计不同主要分为以下几品种型：

　　①毛细管区带电泳（capillary zoneelectrophoresis，CZE）；

　　②毛细管等速电泳（capillarychromatography，CITP）；

　　③毛细管胶速电动色谱（miceller electrokineticcapillary chromatography，MECC）；

　　④毛细管凝胶电泳（capillarygelelectrophoresis，CGE）；

　　⑤毛细管等电聚焦（capillary isoelectricfocusing ，CIEF）。

　　毛细管区带电泳（CZE）为HPCE的根本操作形式，普通采用磷酸盐或硼酸盐缓冲液，实验条件包括缓冲液浓度、ｐＨ值、电压、温度、改性剂（乙腈、甲醇等），用于对带电物质（药物、蛋白质、肽类等）别离剖析，关于中性物质无法完成别离。毛细管胶束电动色谱（MECC）为一种基于胶束增溶和电动迁移的新型液体色谱，在缓冲液中参加离子型外表活性剂作为胶束剂，应用溶质分子在水相和胶束相分配的差别停止别离，拓宽了CZE的应用范围，合适于中性物质的别离，亦可区别手性化合物，可用于氨基酸、肽类、小分子物质、手性物质、药物样品及体液样品的剖析。毛细管等速电泳（CITP）采用先导电解质和后继电解质，构成不连续缓冲体系，基于溶质的电泳淌度差别停止别离，常用于离子型物质（如有机酸），并因适用较大内径的毛细管而可用于微制备，但本法空间分辨率较差。毛细管等电聚焦电泳（CIEF）用于具兼性离子的样品（蛋白质、肽类），等电点仅差0.001可别离的物质。毛细管凝胶电泳（CGE）根据大分子物质的分子量大小停止别离，主要用于蛋白质、核苷酸片段的别离。此外，还有毛细管电色谱（CEC）及非水毛细管电泳（CNACE），用于水溶性差的物质和水中难停止反响的剖析研讨。目前CZE和MECC用得较多，本文以这两种办法为例来阐明HPLC的原理。

　　CZE的根本原理

　　HPLC选用的毛细管普通内径约为５０μｍ（２０～２００μｍ），外径为３７５μｍ，有效长度为５０ｃｍ（７～１００ｃｍ）。毛细管两端分别浸入两分开的缓冲液中，同时两缓冲液中分别插入连有高压电源的电极，该电压使得剖析样品沿毛细管迁移，当别离样品经过检测器时，可对样品停止剖析处置。HPLC进样普通采用电动力学进样（低电压）或流膂力学进样（压力或抽吸）两种方式。在毛细管电泳系统中，带电溶质在电场作用下发作定向迁移，其表观迁移速度是溶质迁移速度与溶液电渗流速度的矢量和。所谓电渗是指在高电压作用下，双电层中的水合阴离子惹起流体整体地朝负极方向挪动的现象；电泳是指在电解质溶液中，带电粒子在电场作用下，以不同的速度向其所带电荷相反方向迁移的现象。溶质的迁移速度由其所带电荷数和分子量大小决议，另外还受缓冲液的组成、性质、ｐＨ值等多种要素影响。带正电荷的组份沿毛细管壁构成有机双层向负极挪动，带负电荷的组分被分配至毛细管近中区域，在电场作用下向正极挪动。与此同时，缓冲液的电渗流向负极挪动，其作用超越电泳，最终招致带正电荷、中性电荷、负电荷的组份依次经过检测器。

　　MECC的根本原理

　　MECC是在CZE根底上运用外表活性剂来充任胶束相，以胶束增溶作为分配原理，溶质在水相、胶束相中的分配系数不同，在电场作用下，毛细管中溶液的电渗流和胶束的电泳，使胶束和水相有不同的迁移速度，同时待别离物质在水相和胶束相中被屡次分配，在电渗流和这种分配过程的双重作用下得以别离。MECC是电泳技术与色谱法的分离，合适同时别离剖析中性和带电的样品分子。

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