如何选择体检项目快速准确筛查新冠病毒？
庚子年初，荆楚大疫，新冠肆虐，封城建院，闭户隔离。父母停工，孩子滞学。白衣执甲，万众一心。举国之力，救治研发。历经磨难，疫情初步可控，百业待兴，复序有望。
随着新型冠状病毒的疫情逐渐得到控制，武汉这座英雄的城市苏醒，全国多地也陆续解封。在加强新冠病毒防控的前提下，各地正积极有序地推进企业单位的复工复产，部分地区也开始为学生复学做准备。复工复学体检是当前亟待解决的问题，全国各地多家医疗机构推出了各种体检套餐，为复工复学保驾护航。然而，复工复产体检，发现不少隐性感染者，给企业复工以及孩子复学带来了很大的安全隐患。
如何选择体检项目能够快速准确地进行筛查新型冠状病毒？
核酸检测的是病毒RNA（核糖核酸），是病毒存在的直接证据，其检测时间较长（长达6个小时），而且采样的质量和样本的处理方法直接关系到结果的准确性。目前，临床上无法完全避免核酸检测的“假阴性”，当在患者病毒核酸检测阴性，但临床又疑似为新型冠状病毒感染时，新型冠状病毒特异抗体（IgM和IgG）检测可以作为有效的补充筛查手段。新冠病毒抗体检测是一种快速、简便的筛查方式，已作为新冠感染的确诊补充被纳入到《新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南（第四版）》和《新冠肺炎诊疗方案（试行第七版）》[1,2]。
抗体检测主要方法有胶体金法、化学发光法等，是检测患者血液中被刺激产生的抗体（IgM和IgG）含量来判断是否感染新型冠状病毒，是间接证据，与核酸检测相比，特别是在感染早期，抗体阳性率较低，间接证据可以对临床有所提示，但仍需直接证据进行确诊。
4月5日下午，国务院联防联控机制就加强医疗物资质量管理和规范市场秩序工作情况举行发布会，国家药监局明确表示：抗体检测试剂仅用作对新冠病毒核酸检测阴性疑似病例的补充检测，或在疑似病例诊断中，与核酸检测协同使用，不作为新冠病毒感染者确诊和排除的依据[3]。
新冠抗体检测的有哪些优势？
快速，15-20分钟出结果；
用血少，10-100微升血清即可实现检测；
简便，无需大型仪器设备；
操作简单，可大量检测，且可在基层实验室完成；
判读方便，当出现C、T两条带，即是阳性；只出现C带，阴性；无带或只出现T带，无效（如下图为IgG阳性）。
新冠病毒抗体（IgM和IgG）检测解读
从机体对病原体的体液免疫应答来看，病原体的特定蛋白如新冠病毒的S蛋白和N蛋白等会刺激免疫系统引起抗体应答。
从时间上来说，最早出现的是IgM抗体，其后是IgA抗体，然后是IgG抗体。
从急性感染的一般过程来看，当IgG抗体出现后，滴度会在一定时间内持续增高，体内存在时间较长；IgA与IgM则持续降低，直至消失。
Zhou等在《Nature》报道称新冠病毒感染者18天体内IgM抗体开始下降，IgG抗体开始上升（见下图）[4]。
因此，特异IgM和IgG抗体是一对出现有序、此消彼长的一个关系，也可以明确患者是否“近期或既往感染过新型冠状病毒”，有助于核酸检测阴性但临床上疑似患者的筛查，并尽快隔离、调整治疗方案。此外，还需要正确地利用IgM与IgG，观察它们的动态变化。
IgG可作为流行病学调查检测指标
IgG阳性表明机体有感染，但不能区分是现症感染还是既往感染。换句话说，IgG阳性者可能是正在受感染者也可能是以前感染过，体内产生了抗体，是感染产生的痕迹。
值得注意的是：不是所有的抗体都具有中和保护力。有些抗体如乙肝表面抗体（HBsAb）是中和性抗体，可保护机体免受乙肝病毒袭击；有些抗体如丙肝抗体只是机体感染过HCV的标志。
就新型冠状病毒抗体而言，IgG抗体中有相当部分是针对病毒的刺突蛋白（SpikeProtein，S蛋白），是患者康复向好的标志之一，但表达水平及其转归变化还有待更多的医学研究与证据支持。
抗体检测可以弥补疑似患者在病毒核酸检测阴性的不足，初步解读如下：
近期抗体检测有了新的发现，Zhao等在《ClinicalInfectiousDiseases》中报道SARS-CoV-2总抗体（Ab）在新冠肺炎诊断中具有重要价值，总抗体包括了IgM和IgG在内的全部新冠病毒特异性抗体。有研究发现总抗体的转化率和检测灵敏度高于IgM和IgG抗体检测，结合RNA和抗体检测可显着提高COVID-19病原学诊断的敏感性，即使在发病后1周的早期[5]。另外，有文章表明SARS-CoV-2特异性抗体具有较高的准确性和阳性预测值，但是发病早期检测容易导致假阴性结果[6]。
抗体检测作为病毒核酸检测的一种有效补充，其检测结果具有流行病学意义，是认识新冠感染发生、发展、预后、转归的重要手段。做临床解释时，需结合临床情况与流行病学综合解读！
根据以上结论，我院检验科于新冠抗体检测报告单备注如下，仅供参考:
1、结果不能作为新冠肺炎确诊和排除的唯一依据，应结合患者流行病学史、临床症状、其他实验室检查综合判断；
2、作为筛查指标，存在假阳性可能，若阳性，建议进行病毒核酸检测或抗原等病原学检测以进一步确定；
3、感染初期，IgM/IgG抗体未产生或滴度很低（低于试剂盒最低检测限），会导致假阴性结果，建议疑似患者隔周再次采样复查，以确定是否出现血清学阳转；感染后期，IgM抗体滴度下降，甚至检测为阴性，此时，IgG抗体持续增高；
4、患者免疫功能受损或接受免疫抑制剂治疗时可能会对结果产生干扰。
其他解读：
1、为什么新冠抗体检测一定要动态观察，而不能只是一次静态检测呢？
抗体检测会因标本中的干扰物质存在而出现假阳性结果，也许有病友或者同道会问，那为什么检测乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）和人类免疫缺陷病毒（HIV）等却可以只检测一次呢？
深究起来其实也不是一次，上述几个慢性感染的病毒，HBV有多个标志物（如“乙肝两对半”），可相互印证，即使出现HBsAg单阳性，也有中和实验确证；而抗-HCV和抗-HIV阳性，也必须经过确证实验（如病毒核酸检测或免疫印迹实验等），才能发阳性报告。
2、抗体检测都有哪些干扰物质？
常见干扰物质分为内源性和外源性。
1、内源性：
内源性干扰物质一般包括：类风湿因子、嗜异性抗体、补体、因使用免疫抑制剂疗的抗体等。
①类风湿因子（Rheumatoidfactors，RF）
在类风湿为主或患有其他疾病的患者乃至正常人血清中，常有不同浓度的RF，RF具有与变性IgG产生非特异结合的特点，可与固相上包被的IgG以及随后加入的标记的IgG结合，从而出现假阳性。
②嗜异性抗体（Heterophilicantibodies）
人类血清中可能会含有抗啮齿类动物（如鼠、马、羊等）的抗体，即天然嗜异性抗体，可通过交联固相和标记的单抗或多抗而出现假阳性反应。
③补体
在固相免疫测定中，来自哺乳动物的固相特异抗体和标记二抗均可以激活人补体系统。因为其在固相吸附及结合过程中，抗体分子发生变构，Fc段的补体C1q结合位点被暴露出来，这样C1q就成为一个中介物将二者交联起来，从而出现假阳性。
④因使用免疫抑制剂靶向治疗
在临床上，有可能使用单克隆抗体进行靶向治疗，及使用放射性核素标记单克隆抗体进行影像诊断等，均有可能使相应患者体内产生抗体，可能产生假阳性。
⑤溶菌酶
溶菌酶可与等电点较低的蛋白有强的结合能力，可在包被的IgG和标记的IgG间形成桥接，从而导至假阳性。
2、外源性：
外源性干扰物质包括：
①标本溶血；
②标本被细菌污染；
③标本贮存时间过长；
④标本凝固不全残留有纤维蛋白原等。
目前，成人中复工检查已经检测出一定数量的无症状感染者，即新冠病毒病原学检测（如核酸阳性），但没有发热、咳嗽咽痛等可自我感知或可临床识别的症状与体征，在病毒转阴前，仍具有传染性。人们对新型冠状病毒的认识也逐渐变得更加深刻。钟南山院士表示，近期很多地方开始实行复工复产的行动，建议复工人员在复工前必须要接受一次“双检测”，即核酸的检测和抗体检测，如果核酸和抗体结果异常，再评估是否需要进行肺部CT检测；如果这两个检测结果能证明没有被感染，可以正常参与工作。
成人尚且如此，儿童何以安全复学？疫情期间，部分患儿可能因症状不典型而被忽视，没有得到及时诊断，这部分孩子若携带病毒时间长，复学后对其他孩子也会存在安全隐患。因此，为了避免孩子上学后的交叉感染，建议复学前进行排查。
【参考文献】
[1]中华人民共和国国家卫生健康委员会.新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案（试行第七版）.2020.
[2]中华人民共和国国家卫生健康委员会.新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南（第四版）.2020.
[3]国务院应对新型冠状病毒感染肺炎疫情联防联控机制.国务院联防联控机制就加强医疗物资质量管理和规范市场秩序工作情况举行发布会.2020.
[4] Zhou,P., Yang, X., Wang, X. et al. A pneumonia outbreak associated with anew coronavirus of probable bat origin. Nature.579, 270-273(2020).
[5]ZhaoJ, Yuan Q, Wang H, et al. Antibody responses to SARS-CoV-2 inpatients of novel coronavirus disease 2019.Clin Infect Dis. 2020.3.28
[6]赵瑾,范俊丽,熊梦园,杨桂,潘运宝,李一荣.胶体金免疫层析法在新型冠状病毒特异性抗体检测中的应用.临床实验室.2020.3.
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