核酸是细胞内的一种大分子化合物,核酸不仅存在于细胞核内,也存在于细胞质中,动物、植物和微生物等都含有核酸。核酸可分为核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)。
经过染料和化学试剂,能够清楚地显示 DNA 和核仁组成区嗜银蛋白(AgNOR)物质。
实验方法原理 | 在一般情况下,通过盐酸水解后使 DNA 残基分解碱基,然后从碳键处打断糖苷键而游离出醛基,再与无色复红液(Schiff)进行反应,形成紫红色的复合物(DNA)。常用 Feuhgen-Rossenbeck 染色法(孚尔根染色法)。 |
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实验材料 | 石蜡组织切片 |
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试剂、试剂盒 | Schiff 试剂染色液浓盐酸蒸馏水二甲苯无水乙醇中性树胶 |
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仪器、耗材 | 滴管 |
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实验步骤 |
Schiff 试剂染色液(见糖原部分)。
5mol/L 盐酸液:浓盐酸(相对密度 1.19)42 ml,蒸馏水加至 100 ml。
1. 石蜡组织切片,常规脱蜡至水。
2. 蒸馏水洗 2 min,5mol/L 盐酸液中水解 30 min。
3. 蒸馏水洗 3 次,浸入 Schiff 染色液中 30 min。
4. 直接浸入自来水中 5 min。
5. 根据需要进行对比染色。
6. 无水乙醇脱水,二甲苯透明和中性树胶封固。 展开 |
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注意事项 |
1. Schiff 试剂每次使用时,要注意吸管淸洁,试剂用后应及时存放冰箱。
2. 对比染色剂可选用亮绿或苯胺蓝,根据需要进行淡染色。 |
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其他 | 结果:DNA 呈紫红色,其他是对比染色。 |
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