血清白蛋白(ALB)溴甲酚绿(BCG)法测定操作规程
1、原理
在pH值4.2时,白蛋白和溴甲酚绿染料结合产生蓝绿色复合物,在630nm处比色,颜色的深度与白蛋白浓度成正比。
pH4.2
白蛋白+溴甲酚绿--------------绿色化合物
2. 标本采集
2.1 病人准备:无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。
2.2 类型:血清、肝素或EDTA血浆。
3. 标本存放 留取标本后请尽快分离血清/血浆。在室温条件下(15~25℃)可以稳定一周,在冰箱保存的条件下(2~8℃)稳定一个月,-20℃保存至少可以稳定3个月。
4. 标本运输 室温条件下运输
5. 标本拒收标准:细菌污染的不能做测定。
6. 实验材料:
6.1 上海申能白蛋白测定试剂盒(货号:11202271701,8×70ml)
6.1.1 试剂组成
柠檬酸盐缓冲液 pH 4.2 30mmol/L
溴甲酚绿(BCG) 0.26mmol/L
表面活性剂 适量
6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂避光保存于2~25℃,若无污染,可稳定至失效期。试剂有效期为24个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。
6.1.4 变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。
6.1.5 注意事项:避免试剂与皮肤及粘膜接触。
6.2 校准品:参见生化检验校准品和质控品.SOP文件
6.3 质控品:参见生化检验校准品和质控品.SOP文件
7. 仪器:奥林巴斯AU1000生化分析仪
8. 操作步骤
8.1 项目基本参数:参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件
8.2仪器操作步骤:参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件
9. 检验结果的判断与分析
10. 质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。
11. 计算方法:以TruCal U复合校准品白蛋白校准值或标准品标准值校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果。手工测定计算方法为:
Au
白蛋白 (g/L)= ×校准液浓度
As
12. 参考值范围
成人 35~52g/L
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。
13. 临床意义:白蛋白是血浆中多种物质重要的结合与运输蛋白,并是维持血浆渗透压的主要组分。血清白蛋白可用于众多疾病的诊断。血清白蛋白升高通检验地带网常见于脱水的。血清白蛋白降低多见于营养不良、肾脏疾病,肝脏疾病,感染性疾病,严重的烧伤和癌症。白蛋白的定量测定有助于对肝脏疾病如肝硬化的诊断与监视。此外,白蛋白量反映了个体的健康与营养状况,因此可用于营养不良的诊断及老年住院患者的预后评估。
14. 操作性能
14.1 线性范围 2~60g/L
14.2 精密度:重复性的评估是根据NCCLS推荐的标准方法,AU1000批内重复性小于3%,总不精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。
批内精密度 n=20 | (g/L) | s (g/L) | CV (%) | 天间精密度 n=20 | (g/L) | s (g/L) | CV (%) |
样品1 | 35.2 | 0.3 | 0.91 | 样品1 | 33.5 | 0.5 | 1.58 |
样品2 | 45.0 | 0.5 | 1.12 | 样品2 | 43.2 | 0.6 | 1.44 |
样品3 | 68.9 | 1.2 | 1.79 | 样品3 | 67.3 | 1.1 | 1.60 |
14.3 方法学比较:本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x),同时对59个样品进行ALB检测,将检测结果作方法学比较,其统计结果如下:y=1.00x-1.1g/L;r=0.998
14.4 灵敏度:2g/L。
14.5 病人结果可报告范围:2~60g/L,如样品测定值超过上限时,应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:1稀释,重新测定,结果乘以2。
15. 超出范围结果处理 本法线性上限为60g/L。如样品测定值超过上限时,应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:1稀释,重新测定,结果乘以2。
16. 病危报警值的处理
17. 方法局限性
17.1本法线性上限为60g/L。如样品测定值超过上限时,应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:1稀释,重新测定,结果乘以2。
17.2干扰物质:当样品中抗坏血酸浓度£1704mmol/L,胆红素浓度£684mmol/L,血红蛋白浓度£ 4.00g/L,甘油三酯浓度£5.63mmol/L时没有观察到干扰。
18. 补救措施:当仪器发生故障时,迅速联系仪器厂家进行维修。
19. 参考文献
1.DOUMAS, B., WATSON, W. A., BIGGS, H. G., CLIN CHIM ACTA 1971; 31: 87-96
2. WEBSTER, D., CLIN CHIM ACTA 1974; 53: 109-115
3. TIETZ, N. W.: TEXTBOOK OF CLINICAL CHEMISTRY, 2ND EDITION, W. B. SAUNDERS COMPANY, PHILADELPHIA, 1994: 703
4. AACC Press Friendman,R.B.,and Young,D.S.,Effects of Disease on Clinical Laboratory Tests,2nd Edition,1989.
5. Rodkey,F.L.,Clin Chem,2:478;1965 www.labdd.com
6. Doumas,B.T.,Watson,W.A.and Biggs,H.G.,Clin Chem Acta 31:87-96,1971.
7. Tietz,N.W.,Clinical Guide to Laboratory Tests,2nd Edition,W.B.Saunders,1990.
8. NCCLS,Interference Testing in Clinical Chemistry,EP7-P,1986.
9. Young,D.S.,Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests,4th Edition,AACC Press,1995.
10. NCCLS,Guideline EP5-T2,1992.
20. 其他:仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》执行。
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