5637细胞| 5637细胞系 培养步骤
5637细胞| 5637细胞系 培养步骤
产品名称:5637细胞
中文名称:人膀胱癌细胞;5637
规格:T25
供应商:上海慧颖生物科技有限公司
复苏周期:10个工作日左右
培养步骤:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,进行离心收集,1000RPM条件下离心8-10分钟,去除上清,按冻存数量加入血清及DMSO,冻存比例为90%FBS+10%DMSO。
PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
慧颖生物是一家专业从事细胞培养相关产品的公司,拥有独立细胞房(可随时约定参观),供应胎牛血清,无血清细胞冻存液,无血清培养基,常规培养基,胰酶,双抗,完全培养基,STR鉴定细胞,感受态细胞等,专业,专注,性价比高,是您Shou选之家。
热卖细胞:
细胞名称
英文简称
细胞类型
小鼠乳腺癌细胞荧光酶标记
4T1-LUC
细胞系
SD大鼠脂肪干细胞+RFP
原代细胞-RFP
原代细胞
绵羊肺成纤维细胞永生化细胞
OAR-L1
原代细胞永生化
奶山羊乳腺上皮细胞永生化细胞
原代细胞永生化
人胆囊上皮细胞永生化细胞
原代SV40永生化
原代细胞永生化
人肺癌细胞红色标记
A549-RFP
细胞系
人肝窦内皮细胞永生化细胞
原代细胞永生化
人结肠癌紫杉醇耐药株系
HCT-15/Taxol
细胞系耐药株
人结直肠癌氟尿嘧啶耐药株
HCT-15/FU
细胞系耐药株
人类星形胶质瘤耐替莫唑胺细胞
U251MG/TMZ-luc
细胞系
人类星形胶质细胞瘤细胞
U251MG/TMZ
构建耐药株
人慢性骨髓性白血病细胞阿霉素
K562/ADR
细胞系耐药株
人脑星形胶质母细胞瘤红色标记
U-87MG-RFP
细胞系
人皮肤成纤维细胞
HSF
原代细胞永生化
人脐静脉内皮绿色GFP标记
原代细胞-GFP
原代细胞
人脐静脉内皮红色RFP标记
HUVEC-RFP
细胞系
人脐静脉内皮绿色GFP标记
HUVEC-GFP
细胞系
人脐静脉内皮
HUV-EC-C
细胞系
人前庭鞘膜瘤细胞永生化细胞
原代细胞永生化
人乳腺癌阿霉素耐药细胞株
Mcf-7/adr
细胞系耐药株
人乳腺癌细胞荧光素酶标记
MCF7-luc
细胞系
人三阴性乳腺癌
MDA-MB-231-luciferase
细胞系
人神经母细胞瘤细胞
SH-SY5Y 转染突变型
细胞系
人神经母细胞瘤细胞
SH-SY5Y 转染野生型
细胞系
人胰腺癌细胞吉西他滨耐药株
PANC-1/GEM
细胞系耐药株
人胰腺神经内分泌肿瘤细胞永生化细胞
原代细胞永生化
人胰腺肿瘤细胞永生化细胞
原代细胞永生化
人胰腺肿瘤相关成纤维永生化细胞
原代细胞永生化
人转移灶淋巴结转移肿瘤细胞永生化细胞
原代细胞永生化
人主动脉内皮细胞永生化细胞
原代细胞永生化
人子宫内膜上皮细胞永生化细胞
原代细胞永生化
大鼠脑微血管内皮细胞永生化细胞
原代细胞永生化
小鼠肺成纤维细胞永生化细胞
原代细胞永生化
小鼠附睾脂肪干细胞永生化细胞
原代细胞永生化
小鼠肝癌细胞荧光素酶标记
HEPA1-6-LUC
细胞系
小鼠骨肉瘤成骨细胞
K7M2WT-LUC
细胞系
小鼠肾小球系膜细胞永生化细胞
原代细胞永生化
小鼠胰腺星状细胞永生化
原代细胞永生化
C57小鼠脂肪干细胞永生化细胞
原代细胞永生化
鸭脑微血管内皮细胞永生化细胞
原代细胞永生化
鸭胚成纤维细胞永生化
Duck embryo
原代细胞永生化
鸭胚肝间质细胞永生化细胞
原代细胞永生化
羊睾丸间质细胞永生化细胞
原代细胞永生化
湖羊瘤胃上皮细胞永生化细胞
原代细胞永生化
中国仓鼠卵巢细胞 CHO-K1悬浮细胞
CHO-K1悬浮细胞
驯化细胞系
猪(杜洛克,莱芜)腹部脂肪干细胞永生化细胞
原代细胞永生化
猪扁桃体上皮细胞永生化细胞
原代细胞永生化
猪肝星状细胞永生化细胞
原代细胞永生化
猪骨骼肌卫星细胞永生化细胞
原代细胞永生化
猪子宫内膜上皮细胞永生化细胞
原代细胞永生化
猪鼻腔粘膜上皮细胞永生化细胞
原代细胞永生化
兔肝脏间质细胞永生化细胞
原代细胞永生化