【操作】

1、预染血清血清0.2ml中加苏丹黑染色液0.2ml，混合置37℃水浴中染色30分钟，离心（2000转/分）约5分钟。以除去悬浮于血清中染料沉渣。

2、制备琼脂糖凝胶板将已配制好的0.5%琼脂糖凝胶于沸水浴中加热融化，用吸管吸取凝胶溶液浇注在载玻片上，约3 ml。静置半小时后凝固（天热时需延长，也可放入冰箱中数分钟以加速凝固）。

3、点样将剪好的滤纸条对折，以折边在距凝胶一端2cm处切一点样口。将毛细管插入预染好的血清中，待吸入部分血清后，取毛细管使其有样品的一端靠于点样口端部，停靠3秒左右。
4、电泳将凝胶板平放入电泳槽中，使加样端接在阴极一侧，用四层滤纸或纱布做成“引桥”，敷于胶板的两端，各搭住凝胶板约1cm左右，“引桥”的另一端浸于电泳槽内的巴比妥缓冲液中。接通电源，首先调节电流为3-4mA/凝胶板，电泳10－15分钟；然后调节电流为6-7mA/凝胶板，电泳 30－40分钟，即可观察到分离的区带。

5、如果需要保留电泳图谱，可将电泳后的凝胶板（连同载玻片）放入清水中浸泡脱盐2小时，然后放烘箱（80℃左右）中烘干即可。

【试剂】

1、苏丹黑染色液将苏丹黑B加到无水乙醇中至饱和，摇荡使乙酰化。用前过滤。

2、巴比妥缓冲液称取巴比妥钠15.4g、巴比妥2.76g及EDTA0.29g，加水溶解后再加蒸馏水至1000ml（pH为8.6，离子强度 0.075），为电极缓冲液。

3、凝胶缓冲液取三羟甲基氨基甲烷1.212g、EDTA0.29g及NaCl5.85g，用蒸馏水溶解后，稀释至1000ml，pH为8.6。

4、琼脂糖凝胶称取琼脂糖0.45 g溶于50 ml凝胶缓冲液中，再加水50 ml。在水浴中加热至沸，待琼脂糖完全溶解后，立即停止加热。

【注意事项】

1、电泳样品应为新鲜的空腹血清。

2、加热溶化琼脂时，须防止水份蒸发过多。琼脂糖凝胶最好随用随制，以免凝胶表面干燥，影响分离效果。

3、制作凝胶板时琼脂糖浓度一般选用0.5%左右为宜，高于1%以上α－脂蛋白部分较紧密，β和前β－脂蛋白部分不够清晰；低于4.5%则凝固性较差，图谱不清。

4、点样口要大小适宜，边缘整齐、光滑，否则会影响电泳图谱。

5、在α－脂蛋白前若出现较浅区带，可列为前α－脂蛋白。

【正常参考范围】

α－脂蛋白　20~30%

β－脂蛋白 20~30%

前β－脂蛋白 0~28%

乳糜微粒（-）