如何选择液相缓冲液pH值
如何选择缓冲液pH值
在选择缓冲液pH值之前，应先了解被分析物的Pka，高于或低于Pka两个PH值单位的，有助于获得好的、尖锐的峰，从公式：pH＝pKa＋log([Ａ-]/[Ａ]）得知，溶液pH值高于或低于pKa两个单位，化合物中99％以一种形式存在，而一种形式存在的化合物才能获 得好的尖锐的峰。显示的是它的离子形式和中性化合物的转变，苯甲酸的 Pka等于4.2，理论上由ＨＨ公示得知，当溶液ＰＨ值等于2.2时，99％的苯甲酸以中性化合物存在，PH值等于6.2时99％的苯甲酸以离子形式存在，所以当缓冲液ＰＨ值等于2.2时，中性化合物以羧酸形式保 留于反相柱，表１列出了一般缓冲液和他们的缓冲范围。从表１知磷酸盐和柠檬酸盐缓冲液能用于ＰＨ值等于2.2。
当化合物只有氨基时，缓冲体系的选择十分简单，大多数氨基化合物在ＰＨ值小于９时都被质子化，所以所有ＰＨ值在７或更低的溶液均适合应用，你也许会问水的ＰＨ值大约是７，为什么还用缓冲盐，因为缓冲盐有助于增加方法的可靠性，以及色谱峰的尖锐性，ＰＨ值的降低有助于氨基化合物保留的减弱，减小化合物与硅胶表面硅羟基的作用，而使峰更尖锐，从表１可知，任何缓冲液均可应用于氨基化合物的分析，但我们认为ＰＨ值等于３的磷酸钾盐最适合用于氨基化合物的分析。
在上面两个例子中，PH=3的磷酸钾盐都能获得良好的应用，在一般情况下，它是含羧基和氨基化合物分析中最好的缓冲液，并且我们认为在氨基化合物分析中钾盐比钠盐更好。
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