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利用 Marligen 总 RNA 快速纯化系统纯化总 RNA 实验

2019.9.12

           

试剂、试剂盒

乙醇 β-巯基乙醇

仪器、耗材

转子-定子均化器或类似设备 Marligen Rapid Total RNA System

实验步骤

一、材料

1.缓冲液、溶液和试剂

乙醇,70%和100%

β-巯基乙醇

2.特殊设备

转子-定子均化器或类似设备

3.其他

Marligen Rapid Total RNA System(Marligen Biosciences)

二、方法

(1)加β-巯基乙醇制备裂解溶液。

(2)按照厂商的方案要求,向细胞和组织样品中加裂解溶液(裂解液体积取决于所处理样品的大小)。用转子-定子均化器或类似设备均化。

(3)向裂解产物中加等体积的70%乙醇。均质化裂解产物以使沉淀分散。

(4)将裂解产物置随试剂盒提供的离心套柱中,在微量离心机中12000~16000g离心。

(5)用700ul洗涤缓冲液1洗涤一次,12000~16000g离心1min。

(6)用洗涤缓冲液2洗涤两次,每次500ul,12000~16000g离心1min。

(7)12000~16000g离心2min以移弃残留洗涤缓冲液。

(8)参照试剂盒的使用说明用适董的水从柱中洗脱RNA。然后储存于-70°C。较少的样品可用45ul水洗脱,样品较多可用20ul水洗脱。

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