极限培养基的配制
试剂、试剂盒 水Na2HPO4KH2PO4NH4Cl抗生素
仪器、耗材 玻璃瓶烧瓶
实验步骤
1. 在一个2L烧瓶中，将如下配方中的各成分加入水中， 加热搅拌直至其溶解。
（1）5 X M9培养基，每升
30 g Na2HPO4
15 g KH2PO4
5 g NH4Cl
2.5 g NaCl
15 mg CaCl2 （可加可不加）
（2） 5 X M63培养基，每升
10 g (NH4)2SO4
68 g KH2PO4
2.5 mg FeSO4 • 7H2O
用KOH调pH至7. 0
（3） 5 X A培养基，每升
5 g (NH4)2SO4
20.5 gKH2PO4
52. 5 g K2 HPO4
2.5 g 二水柠檬酸
（4） 1 X 培养基
用无菌水稀释5X培养基，并且每升加人以下无菌溶液
1 ml 1 mol/L MgSO4 • 7H20
10 ml 20%碳源（糖或甘油）
2. 倒入玻璃瓶中，拧松盖子，于15 lb/in2 高压灭菌15 min。
3. 待培养基冷却至50°C以下（在这个温度时，手持瓶子可感觉热但能握得住），再加人其他补充成分和抗生素，玻璃瓶冷却至40°C以下，盖紧盖子。
4. 可于室温无限期保存。
其他
1. 如果需要还可加入以下溶液
0. 1 ml 0.5%维生素B1（硫胺素）
5 ml 20% 酪蛋白水解物（casamino acid）（Difco）或L-氨基酸至40 μg/ml或 DL-氨基酸至80 μg/ml
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