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RPMI1640培养基的配制及细胞培养的条件

2020.9.01

一、 培养基的特性——细胞生存的环境与条件

1、温度条件(37±0.5℃)
  2、pH条件 (7.2~7.4)
  3、气体条件
  4、水的质量(三蒸)
  5、渗透压
  6、营养条件
  7、无菌条件

二、培养基的分类

1、平衡盐液
  2、天然培养基(小牛血清、胚胎液)
  3、合成培养基(化学成分清楚)

三、RPMI1640培养基的配制

1、RPMI1640 10g
  2、丙酮酸钠 0.11g
  3、Hepes(羟乙基哌碃乙硫磺酸)5.925g
   4、NaHCO3 2g
  5、三蒸水 1000ml

电磁搅拌,过滤出菌,并进行无菌实验

四、过滤出菌

仪器:不锈钢正压滤器

材料:纤维素微孔虑膜 (0.22mm孔径)

装好后消毒

五、完全培养基的配制

RPMI 1640培养液85ml
  小牛血清 10 ml
  谷氨酰氨 1ml
  抗菌素(青、链霉素)1万单位 1ml

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