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高效液相色谱中理论塔板数的计算方法

2021.8.19

理论塔板数=5.54(保留时间/半高峰宽)2 (2是平方)。

理论塔板数用于定量表示色谱柱的分离效率,N取决于固定相的种类、性质(粒度、粒径分布等)、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质。如果峰形对称并符合正态分布,N可近似表示为N=(tR/σ)2=16(tR)2/W =5.54(tR/W1/2)2。

W表示峰宽,σ表示曲线拐点处峰宽的一半,即峰高0.607处峰宽的一半,N为常量时,W随tR成正比例变化。在一张多组分色谱图上,如果各组份含量相当,则后洗脱的峰比前面的峰要逐渐加宽,峰高则逐渐降低。

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效液相色谱HPLC分析注意事项

用0.2μm滤纸过滤溶剂或流动相,并进行超声脱气。

启动时应采用色谱级水清洗色谱柱,有助于延长色谱柱的使用寿命、检测器的稳定运行,确保检测结果的准确性。

通过软件监视各项读数,当检测器检测到样品所有峰值,停止运行并设置新的进样。在下一个样品分析前,建议留出5-10分钟,待流动相通过色谱柱,以便清洗之前样品的残留物,确认基线稳定后,进行下一次注射。


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