为了扩展特异性研究，对27种不同的血清与固定了HA/H3N2的表面之间的结合进行分析(图5、表2)。结果显示只有特异针对H3N2亚型的血清才能与表面明显结合。抗-B和抗-H1N1血清显示出低的结合水平。相应地，利用50 mM HCl、0.05％ P2O再生后，也开展了27种血清与固定了HA/B和HA/H1N1的表面结合的实验。结果显示只有抗-B和抗-H1Nl血清分别明显结合(数据未显示)。

图3定量B/Jiangsu/10/2005的血清响应水平。参照抗原稀释后，与浓度为0.5-16ug/ml的相应血清混合。在固定了重组HAB的表面上重复分析校准点(实心菱形)、样品(空心菱形)和对照样品(6 ug/ml，空心正方形)。计算出的浓度显示在表1。

图4流感亚型特异性。在同一实验中在三个表面A/H3N2(A)、A/H1N1(B)和B(C)上分析不同血清毒株的结合水平。样品中要么含有血清，要么含有混合了2ug/ml各自参照抗原的血清。

    图5 27种不同血清(表2中详细说明)在固定了重组HA/H3N2的传感器芯片上的响应。A/H3N2血清毒株的结合以实心菱形标出，A/H1N1血清毒株以空心菱形标出，B毒株以空心正方形标出。用50 mM HCl和0.05％ P2O再生表面。血清1和2重复分析两次，以监测响应偏差。

    开展初步分析以探索毒株特异性。在固定了重组HAA/H3N2/Wyoming的传感器芯片上运行校准曲线，该曲线有着标准品和血清的四个可能组合，针对随机选择的H3N2毒株Wyoming和New York(图6A)。最低浓度的响应水平范围在1700-2000个RU。为了利于比较，将各个曲线的每个响应除以最低浓度(以％表示)，来标准化响应。曲线以N.Y/N.Y、N.Y/W、W/W和W/N.Y的顺序运行。W/W组合在另一块有着相似固定水平的芯片上重复运行4次，提供实验差异的参考数据(图6B)。结果显示所有W/W组合的抑制实现了最高的灵敏度。结果还表明，就这两个毒株而言，如果用New York标准品和血清来定量Wyoming样品，合获得过高的计算浓度值。

    在疫苗纯化过程中，各个步骤的样品有着不同的纯化图，可能会含有影响浓度分析的化合物。为了研究分析中添加剂的影响，分析前在参照抗原中加入了BSA、-DNA、细胞培养基、蔗糖和盐。结祟显示在表3。BSA、-DNA和细胞培养基不影响分析。盐和蔗糖降低了响应，显著增加了表观浓度：然而这些添加剂的影响可用稀释处理来避免。研究发现1<％的蔗糖和<0.2 M的NaCl对于可靠定量是理想的。还重复运行了含有55 ug/ml纯化的A/H1N1/Solomon slond的对照样品，以研究准确性。在一个分析(一块芯片/凝胶)内，生物传感器方法的内部CV为2％(5次重复)，而SRID为9％(12次重复)。两个操作员在不同时间所做的不同分析之间，生物传感器方法的内部CV为5％(3次分析)，而SRID为18％(5次分析)。

图6实例显示固定了重组HA A/H3N2/Wyoming的传感器芯片上的毒株特异性。用针对两个H3N2毒株Wyoming和New York的四个标准品和血清的可能组合，运行校准曲线。将各个曲线的每个响应除以最低浓度(以％表示)，来标准化响应，便于比较。曲线是以所使用的标准品/血清来命名的，如W/N.Y意味着这条曲线使用了标准品Wyoming和血清NewYork(A)。W/W组合在另一块有着相似固定水平的芯片上重复运行了4次，提供实验差异的参考数据(B)。