溶剂前处理注意这几点
最好使用HPLC级的优质溶剂,使用前必须过滤和脱气。注意以下几点:
1)过滤目的:
溶剂进泵前和样品注射前应该过滤除去溶剂中的微小颗粒、微生物,保证泵和色谱柱不会堵塞或损坏,保证分析数据可靠。
2)对过滤器的要求和最 jia孔径选择方法:
对过滤器总的要求:速度快、溶出度小、死体积小、精 que的孔径、体积适当、化学兼容性好等。
最佳孔径选择方法:如果色谱柱填料直径小于3µm或除菌过滤,一般选择0.2µm孔径;如果色谱柱填料直径大于5µm,则选0.45µm;如果是预过滤或过滤难过滤的样品,一般选1µm孔径。特别是对使用无机盐配制的缓冲液,更要注意选择合适的过滤器!否则,不可能得到可靠的分析测试数据!
3)脱气:
主要目的是:除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡。液相色谱流动相脱气使用较多的是离线超声波振荡脱气、在线惰性气体鼓泡吹扫脱气和在线真空脱气。流动相的气泡进入液相泵会引起压力的上下波动,危害很大,必须除之,可以打开排空阀,大流速冲洗。
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