平衡透析法测定血浆蛋白结合率的介绍
平衡透析法是定量研究蛋白质与小分子结合平衡的一种传统且成熟的膜分离技术。平衡透析法的工作原理是基于分子大小或者重量不同，将大分子溶液和小分子溶液分别置于只允许小分子透过而不允许大分子透过的半透膜两侧，它是在无外力驱动条件下，药物分子扩散透过半透膜，当透析达到平衡时，测定膜两侧溶液中小分子的浓度，通过计算即可分析得大分子与小分子结合的数据。该方法在溶液中完成，血浆和缓冲液的pH值以及离子强度保持相对恒定，可以最大限度反映体内情况，结果可靠，故经常作为经典参比方法。龙友琦等采用平衡透析法测定了不同浓度下丙泊酚微乳注射液的血浆蛋白结合率。结果证明丙泊酚微乳注射液属于高蛋白结合药物，应用时应充分考察药物联用时其对蛋白结合率的影响，保证人体用药的安全。
平衡透析法存在耗时过长的缺点，通常需要12-48h。半透膜与蛋白质易产生体积迁移效应，对于带电的蛋白质可能产生Gibbs-Donna效应以及非特异性的透析设备表面的药物吸附效应。目前商品化96孔平衡透析装置应用于血浆蛋白结合率的测定，该装置能够减少非特异性的透析设备表面的药物吸附，并且能够加速待测样品的溶解，缩短平衡时间，提高样品分析的通量。此外，平衡透析法结合电化学发光 ，荧光以及质谱等高灵敏度检测方法已经应用于血浆蛋白结合率的测定。采用传统的平衡透析方法，利用毛细管电泳-电化学发光技术成功的测定了丙吡胺与人血浆蛋白的结合率。
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