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石蜡切片的制备指南（四）

2020.4.29

前言:

制备高质量的病理切片需要一定的技巧和经验。

该教程的目的是协助初学者熟悉石蜡切片的制备，以及作为经验更丰富的技术专家的进修课程。涵盖轮转式切片机制备石蜡切片的设置和操作相关的基本内容。同时对切片过程中的部分常见故障进行具体说明，并提供故障排除建议。

06 设定最佳刀片间隙角

刀片间隙角可调,必须进行恰当设定以达到最佳性能。

间隙角可防止刀面和蜡块表面接触。

切面角是形成切削刃的两个切面之间的角度。对于常规使用的刀片和可调换式刀片,切面角大约为35°°,但该角度可能因刀片类型和制造商的不同而发生

因此,必须针对每种刀片类型设定最佳间隙角。

在进行角度设定时,应遵循切片机制造商指南。对于Leica生物系统的刀片和刀片架,推荐的设定角度为1至5°

07刀片最长使用寿命

采用一些简单的策略可使每个刀片均达到最长的使用寿命。

清洁刀片时,避免沿刀刃拖动任何物品。即使是纤维素纤维亦可以对刀片造成损坏。

避免刀刃接触任何硬质物体,如钳子或刷子。

有条不紊的使用刀片,从一端工作至另一端。这将使刀片的每一部分均达到最大使用寿命。

使用刀片的一部分进行修块,使用另一部分进行最终切片,或者使用独立刀片进行此两个步骤。

回缩式切片机可在刀片上行运动过程中使蜡块与刀片脱离接触,从而使刀片寿命最大化,且可防止刀片复位过程中产生碎片。

08确定定向蜡块

切割冲程中蜡块与刀片的定向可以影响获取带状物的难易程度,并可直接影响切片的质量。

在大多数实验室,所有包埋盒均按照相同的方向被置于样本夹上(如东-西方向且标签向左,或北南方向且标签向上)。这样处理的目的在于在制备高质量切片之前对多个蜡块进行粗修,并允许对组织进一步切割或再切割。且不会造成组织损耗过大。因此,在包埋阶段即必须考虑到蜡块与刀片的相对方向,此要求经常被忽视。

图A为部分典型蜡块的最佳取向。针对特定的蜡块类型,何种取向为最佳可能存在不同意见,但必须意识到取向的重要性并加以考虑。

例A.肠:刀片持续性通过粘膜

例B子宫颈:最好是将组织致密处呈递至刀片,而非直边。

例C皮肤:刀片持续性通过表皮

切片机(如RM2235)还配备有可进行校准控制的精密定位装置,可以在x/y轴上很容易找到零点或可测量的变量。此项功能非常有助于对其他实验室制备的蜡块或已经过其他切片机切割的蜡块进行再切割,因为其需要精确对齐以防止不必要的组织损失。同时对多个蜡块进行切割时应常规使用,重要的是在开始切割之前夹持架应被设定至x/y轴的零位置。通过采用指示器(红色)、切口点(点击停止)和指示标记即可非常容易地实现此设定。