影响心脏活动的化学因素实验

实验方法原理 细胞的正常生理活动有赖于其所处环境的稳定。心脏的正常功能的维持同样需要一个适宜的理化环境，如组织液中K+、Ca2+的浓度，适宜的酸碱度和温度。在体心脏还受到交感神经和副交感神经的双重支配，交感神经兴奋时，其末梢释放去甲肾上腺素（NE），作用于心肌细胞相应受体，可使心率增快、传导加速、心肌收缩力增强；迷走神经兴奋时，其末梢释放乙酰胆碱（Ach），可使心率减慢、传导减慢、心肌收缩力减弱。蟾蜍心脏离体后，用理化性质近似于蟾蜍血浆的任氏液灌流心脏，在一定时间内，可保持其节律性收缩和舒张。改变其灌注液的成分，会影响心脏的功能活动。

在疾病状态下，有时心脏的收缩力会明显减弱，强心苷类药物如洋地黄可以改善心肌的收缩力，因此，具有改善心脏功能的作用。

实验材料 蛙蟾蜍

试剂、试剂盒 任氏液无钙任氏液氯化钙溶液1％氯化钾溶液去甲肾上腺素乙酰胆碱乳酸溶液碳酸氢钠溶液洋地黄任氏液

仪器、耗材 二道生理记录仪微机生物信号采集处理系统张力换能器蛙类手术器械玻璃蛙心插管蛙心夹双凹夹铁支架丝线细长吸管烧杯

实验步骤

一、材料制备

１. 离体蛙心标本的制备

2. 实验装置连接　用试管夹和双凹夹将蛙心套管固定于铁支架上，在心室舒张期，用蛙心夹夹住心尖，并将蛙心夹上的线连至张力换能器，连线应保持垂直，松紧适当。再将张力换能器与微机生理信号采集设备连接（图1）。

二、观察项目

1. 描记正常的蛙心搏动曲线，注意观察心跳频率、心室的收缩和舒张程度。记录一段正常蛙心跳动曲线，用作对照。

2. 蛙心插管内的任氏液全部更换为等量的无钙任氏液，观察心跳变化，记录一段心搏曲线。

3. 吸出无钙任氏液，用正常任氏液反复换洗数次，待心跳曲线恢复正常后，在灌注液内滴加3％氯化钙溶液1～2滴，观察心跳变化，记录一段心跳动曲线。

4. 将含有氯化钙的灌注液吸出，用任氏液反复换洗，待曲线恢复正常后，在灌注液内滴加1％氯化钾溶液1～2滴，观察心跳变化，记录一段心跳动曲线。

5. 将含有氯化钾的灌注液吸出，用任氏液反复换洗。待曲线恢复正常后，在灌注液中加1∶10 000肾上腺素溶液1～2滴，观察心跳变化，记录一段心跳动曲线。

6. 将含有肾上腺素的灌注液吸出，用新鲜的任氏液反复换洗，待曲线恢复正常后，在灌注液中加1∶100 000的乙酰胆碱溶液1～2滴，观察心跳变化，记录一段心搏曲线。

7. 加10%的洋地黄任氏液1滴于蛙心套管内，观察1～2 min，如收缩幅度无明显变化，可再加1～2滴，直至出现明显的强心作用为止，待强心作用明显后，再逐滴加10%洋地黄任氏液，直至出现明显中毒现象为止，观察心跳变化，记录一段心跳动曲线。

注意事项

1. 制备蛙心标本时，勿伤及静脉窦。

2. 每次换液时，蛙心套管内液面应保持同一高度。

3. 随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润。

4. 各种试剂的滴管应区分专用，不可混用，以免影响实验结果。

5. 加试剂时，先加l～2滴，用滴管混匀后如作用不明显可适当补加，但须逐滴加入，密切观察药物剂量添加后的实验结果。

6. 上述各实验项目，一旦出现作用，应立即将套管内的液体吸出而以正常任氏液换洗，以免心肌受损，并重复换洗几次使心搏曲线恢复正常后方能进行下一步实验。

7. 每项实验都应有前后对照。