酶标仪
操作事项
酶标仪的功能是用来读取酶联免疫试剂盒的反应结果，因此要得到准确结果，试剂盒的使用必须规范。许多医院在使用酶标仪之前是通过目测判断结果，操作过程随意性较大，在使用酶标仪后如果不能及时纠正操作习惯，会造成较大误差。在酶标仪的操作中应注意以下事项：
1.使用加液器加液，加液头不能混用。
2.洗板要洗干净。如果条件允许，使用洗板机洗板，避免交叉污染。
3.严格按照试剂盒的说明书操作，反应时间准确。
4.在测量过程中，请勿碰酶标板，以防酶标板传送时挤伤操作人员的手。
5.请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部，操作完成后请洗手。
6.如果使用的样品或试剂具有污染性、毒性和生物学危害，请严格按照试剂盒的操作说明，以防对操作人员造成损害。
7.如果仪器接触过污染性或传染性物品，请进行清洗和消毒。
8.不要在测量过程中关闭电源。
9.对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差，应根据实际情况及时修改参数，以达到最佳效果。
10.使用后盖好防尘罩。
11.出现技术故障时应及时与厂家联系，切勿擅自拆卸酶标仪。（擅自拽板是酶标仪损坏的重要原因）
常识梳理
为什么酶标仪的标准配置包括405nm,450nm,490nm及630nm四块滤光片具有紫外功能的酶标仪还配备有340nm.
目前用于酶联免疫吸附测定,常使用的标记用酶是辣根过氧化物酶(HRP)，对应的底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD)。底物在过氧化氢溶液的存在下，经辣根过氧化物酶作用，分别氧化为2，2，—二氨基偶氮苯(DAB)和联苯醌。邻苯二胺(OPD)的氧化产物DAB,在pH值为5．0左右时，在450nm波长处有大吸收，此时可用450nm的滤光片测定吸光值。当加入强酸作为终止试剂终止反应时，pH值降到接近0，此时大吸收波长移至492nm，此时可用492nm的滤光片测定吸光值。
四甲基联苯胺(TMB)的氧化产物联苯醌，一般在波长为450nm处有大消光系数。使用硫酸作为终止剂可使产物稳定90min，便于检测。因此，450nm和492nm两个波长是目前ELISA测定常用的。有的酶标仪以490nm滤光片替代492nm滤光片，影响不大。
除了这两个基本滤光片外，考虑到双波长比色的需要，还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片，双波长比色主要用于消除非特异干扰的影响。
如果实验需要用酶标仪作微量生化测定，就需要扩展紫外检测功能，此时需要一个340nm波长滤光片。
总之，以上介绍的是常用的几个波长的滤光片，用户还可以根据自己的需求选择其他波长的滤光片。一般各种酶标仪都配有放置滤光片的可自动转换的部件，可以同时安装6～8片滤光片，可以满足用户的不同需求。
2.酶标仪分类
A.按照功能的划分,酶标仪可以分为光吸收酶标仪,荧光酶标仪,化学发光酶标仪和多功能的酶标仪.
光吸收酶标仪是用来进行可见光与紫外光吸光度的检测.特定波长的光通过微孔板中的样品后,光能量被吸收,而被吸收的光能量与样品的浓度呈一定的比例关系,由此可以用来定性和定量的检测.光吸收的检测技术成熟,成本低,操作简单,但是动态范围窄,灵敏度比较低,特异性不强.一般可见光和紫外光分别采用钨灯及氘灯作为光源,发展的主流是LED光源，而紫外/ 可见酶标仪是可以将两种光源进行切换，适应不同测量波长的需求。
荧光酶标仪是用来进行荧光的检测.通过激发光栅分光后的特定波长的光照射到被荧光物质标定的样品上后,会发出波长更长的发射光,通过发射光栅后到达检测器.荧光的强度与样品的浓度呈一定的比例.荧光检测灵敏度高,可实时检测,使用方便,检测模式多样,但是容易受外界干扰,激发光与发射光容易互相影响,干扰检测.
化学发光是来自生物化学反应中的自发光,可分为辉光型和闪光型两种类型.辉光型发光持久,稳定,能持续一段时间;闪光型发光时间短,变化快,稳定性不强,需要应用自动加样器才可以进行.化学发光中发出的光子数与样品量呈一定比例关系,化学发光酶标仪灵敏度非常高,动力学范围广.
多功能酶标仪是以上三种酶标仪的集合,它集成了两种或者三种酶标仪于一体,可以同时进行光吸收,荧光和化学发光的检测,功能强大,使用范围广,可作为研究平台,避免了重复购买.
B.酶标仪基于滤光方式的不同可分为滤光片式的酶标仪和光栅式酶标仪.
滤光片式酶标仪采用滤光片来进行波长的选择,酶标仪内置滤光片轮,可选择试验所需的不同波长的滤光片来进行分光,光源发出的全波谱光经过滤光片后,大部分被过滤,只剩下滤光片本身允许的波长通过,这样就可就通过滤光片来获得特定的波长.滤光片轮一般包含4-6块滤光片,通过选择不同的滤光片可获得不同的波长,但是获得的波长都是固定的,受到一定的限制,不能获得任意所需的波长,而且更换滤光片价格比较昂贵.
光栅式酶标仪虽然才出现短短十年,但是发展非常迅猛,现在已经是主流的酶标仪.它采用光栅进行分光,光源发出的全波谱光线经过光栅后,通过光栅上面分布的一系列狭缝的分光,就可以获得任意波长的光，波长连续可调，一般递增量为1nm.光栅式酶标仪使用方便灵活,可以通过软件选择任意波长的光,而且可以进行全波长的扫描,通过全波长扫描可以获得未知样品的吸收峰,从而可以达到检测未知样品的目的,在实验室中很受欢迎,可以进行更多实验的检测.因此目前在国内的普及程度很高.
C.另外根据通道的个数，可以将酶标仪分为单通道和多通道酶标仪，单通道又有自动和手动之分。
