石蜡切片的制备指南（五）
09了解切片机的设计特点及其使用方法
回缩式切片机的设计理念在于标本上行冲程中回缩,让蜡块远离刀片。重要的是要知道您所使用的切片机是否具备此功能。
回缩是切片机的设计特点之一,可在切片过程中提供独特的优势并可延长刀片寿命。
当使用回缩式切片机时,蜡块下行冲程中必须将蜡块表面对齐刀口(即处于前出位置,而非退缩位置)。
当标本夹处于退缩位置时,如果蜡块仍然与刀口非常接近,在手轮下一次完整旋转时,蜡块将前出,前出量为退缩量+选定的切片厚度。这将导致切片厚度增加,并可能导致损坏蜡块和刀片。
切片机也可以手动、半自动或全自动。
自动化设备可减少重复动作,而这些动作可能导致肌肉骨骼疾病。
10“修块”、“表面加工”或“初步加工”时应注意
切片机的该阶段需要非常小心，因为样本表面具有诊断学意义的组织很容易丢失或损坏。
在您开始修块之前,请务必确保所有的夹持机械均已得到安全加固。
正确修块的目的在于将组织保守暴露至一定水平,在该水平可以获得目标性切片。
当厚度为10至30μm时,通常应进行修块。
对脆性组织进行快速粗修可能破坏标本表面。在30μm厚度使用机械修块设备时应特别注意。
最后一步则通过轻柔切割少许薄切片对蜡块进行磨光。
在对蜡块进行修块之前,持刀架底部夹架A、侧向位移夹B和x-y定位夹C均应该牢固锁定。如果不执行此操作,可能会损坏蜡块和刀片。
当进行初步加工时,机械修块设备时应谨慎使用,尤其是较低)设定被激活时可导致30μm的前出。
当初步加工时,粗进刀轮需要谨慎使用,以避免从样品表面意外切割较厚切片并造成损害。
11考虑切片厚度的影响因素
按照需要设定切片机,但请注意,有许多因素均可影响实际的切片厚度。
4μm厚的粘性切片会比2μm厚的严重破坏切片提供更多的信息。
当对冷冻蜡块进行切片时,条带中第一对切片的实际厚度可能比预期值厚。主要原因是由于热膨胀(请参见下文第1、2和3节)。
其他因素，如旋转速度、间隙角设置和刀刃的情况,均会影响获得的实际切片厚度。
12确保蜡块冷冻
当标本和石蜡的硬度匹配良好时,切片质量通常可得到改善。正是由于该原因,大多数石蜡块在切片时必须冷冻。用于冷冻蜡块的方法亦非常重要。
冷冻石蜡可为标本中的较硬成分提供更好的支持,以获得更薄的切片。
将蜡块置于冷却台或湿冷表面,持续几分钟(比如融冰的表面)。
水将小幅度渗透进入蜡块,使组织肿胀,因此更适合进行切片。对于过度脱水、过度干燥或易碎的组织,这将非常重要。
如果组织与周围石蜡存在接触不良,将蜡块置于冰箱中会导致此处的表面开裂,可能更难以获得粘性切片。
左边的切片源自于一块未进行冷冻的温度相对较高的蜡块。右边的切片源自于一块相同、但在融冰表面进行了冷却的蜡块。
