【求助】你们的Stripping buffer配方

最新回复

• DONT (2013-11-15 17:36:47)

  
  我们没有用过洗脱液，最多用tbs洗一洗， 一张膜发过荧光以后，直接再和另一个一抗共同孵育，只要分子量相差一些条带不会重合在一起，就可以了。
  而且，在两个一抗都是共同来源的情况下（如都是兔抗）也可以这样做。

• DDD (2013-11-15 17:37:22)

  
  群里的一个Protocol描述的
  14.4mol/L 2-Mercaptoethanol（β-巯基乙醇） 700μl
  SDS 2g
  0.5mol/L Tris•HCl（pH6.8） 12.5ml
  超纯水至 100ml
  牛战友“llllcjchina”的配方
  100mM 2-mercaptoethanol (stock 14.335M, 取697.6ul)
  2% SDS (stock 10%, 取20ml)
  62.5mM Tris (pH6.7)(stock 1M, 取6.25ml)
  加水至100ml
  差不多啊。
  好奇楼主用什么配方，如何strip，55°摇30mins，效果如何？

• yes4 (2013-11-15 17:37:57)

  
  我们就用0.1M PH2.5的甘氨酸洗，很好用的！

• wmp1234 (2013-11-15 17:38:23)

  
  水中5分钟；0.4M NaHO 5分钟；水中洗5分钟。
  NaHO中千万不可多洗，不然膜就废了。。

• mysmdbl (2013-11-15 17:38:43)

  
  我试过很多，但是效果都不好！要不是迫不得已，最好别用！

• yysr238 (2013-11-15 17:39:04)

  
  TBST摇过夜就行其实。。。。最温和。。。。