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化学键合相色谱法的流动相

2018.4.13

  二. 流动相

   化学键合相色谱所用流动相的极性必须与固定相显著不同,根据流动相和固定相的相对极性不同分为:

   1. 正相键合相色谱法:流动相极性小于固定相极性。

   常用非极性溶剂如烷烃类溶剂,样品组分的保留值可用加入适当的有机溶剂(调节剂)的办法调节洗脱强度。常用有机溶剂为极性溶剂如氯仿、二氯甲烷、已腈、醇类等。

   适用于分离中等极性化合物,如脂溶性维生素、甾族、芳香醇、芳香胺、脂、有机氯农药等。

   2. 反相键合相色谱法:流动相极性大于固定相极性。

   流动相多以水或无机盐缓冲液为主体,再加入一种能与水相混溶的有机溶剂(如甲醇、乙睛、四氢呋喃等)为调节,根据分离需要,改变洗脱剂的组成及含量,以调节极性和洗脱能力。在反相键合相色谱中,极性大的组分先流出,极性小的组分后流出。

   固定相一般为C18、 C8。

  反相键合相色谱法应用最广泛,因为它以水为底溶剂,在水中可以加入各种添加剂,改变流动相的离子强度、pH 值和极性等,以提高选择性,而且水的紫外截至波长低,有利痕量组分的检测,反向键合相稳定性好,不易被强极性组分污染,且水廉价易得,安全。

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