紫外分光光度计检测血中碳氧血红蛋白含量诊断一氧化碳
紫外分光光度计检测血中碳氧血红蛋白含量快速诊断一氧化碳中毒
摘要：目的 建立4300紫外可见分光光度计捡剥血中碳氧血红蛋白含量方
法快速诊断一氧化碳(CO)中毒，方法检血用0 1％Na2CO3稀释．加入连二亚硫酸钠．4300紫外可见分光光度计测定500 nm～600nm吸收光谱和538nm和555nm处吸光度值，确定碳氧血红蛋白，计算碳氧血红蛋白含量。
结果 氧和血红蛋白的zui大吸收波长为555 nm，碳氧血红蛋白的zui大吸收波长为538 nm和555 nm。4300紫外可见分光光度计检测血中碳氧血红蛋白含量(10％～90％)回收率平均为95％一l10％．标准差为2.1％-8. 0％，zui低检出农度为2％：
80例可疑CO中毒者中63例血中检出碳氧血红蛋白，平均含量为35％。
168倒可疑CO中毒死亡者中124例血中检出碳氧血红蛋白。
结论4300紫外可见分光光度计检测血中碳氧血红蛋白，具有快速、准确、操作简便、结果可靠的特点，可应用于CO中毒的诊断和CO中毒死亡的法医学鉴定。
关键词：一氧化碳中毒；碳氧血红蛋白；4300紫外可见分光光度计
1资料与方法
1.1药品和试剂：连二亚硫酸钠、肝索钠均为国产分析纯。
1.2主要仪器：4300紫外可见分光光度计，扫描渡长范围(200--700)nm。
1.3标本采集：可疑CO中毒病人，肘静脉采血(5～10)mL，加入肝素化试管中，试管上部不留空问，密封，立即送检。
1.4碳氧血红蛋白定性定量检验：检血40uL，加入1 0mL0 1％Na2CO3溶液，4300紫外分光光度计测定(500--600)nm吸收光谱及538nm和555nm处吸光度值(和A555)。根据吸收光谱形状和zui大吸收波长确定有无碳氧血红蛋白，按公式COHb％=A538÷A555÷0 458 -1.692计算血中碳氧血红蛋白含量。
2结果
2.1 碳氧血红蛋白光谱扫描图
取新鲜肝素钠抗凝人血100mL_通人CO饱和(2-3)h，充分饱和，使碳氧血红蛋白含量达100％。配制不同碳氧血红蛋白含量的系列血液样品，按上述方法操作和扣描，得到不同碳氧血红蛋白含量血液的光谱扫描。
2.2 血中碳氧血红蛋白含量检测回收率
用空白血和CO充分饱和血(碳氧血红蛋白含量为100％)配制不同碳氧血红蛋白含量(10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％)的系列血液样品，每个浓度血样按前述方法取5份检测氧血红蛋白含量。详见表1
2.3 中毒病人检测
选择2005年1月1日-2005年12月30日山西医科大学*医院急诊科、山西医科大学第二医院急诊科、山西省人民医院急诊科所送可疑CO中毒病人80例，其血中碳氧血红蛋白含量检测结果。共检验80例，枪出COHb者63例，未榆出COHb者17例，COHb含量35％，检出含量25％～65％。
2 4 CO中毒死亡者检测
2005年1月1日-2005年12月30日山西省范围内部分可疑CO中毒死亡案例检测结果。共检验168例，未检出COHb者44例(26.2％)，检出COHb者124例(73.8％)，COHb含量9.0％-70.6％，其中<10％例(0.08％)，10％～20％6例(4.80％)，20％～30％8例(6.45％)，30％～40％i例(0.08％)．40％～50％9例(7.25％)，(50％～60％)，51例(41 1％)，61％～70％35例(28 20％)，>70％13例(10.50％)。
3讨论
3.1血中碳氧血红蛋白检测
建立血中碳氧血红蛋白的4300紫外可见分光光度计检测方法，光谱扫描和吸光度值可同时进行，整个检验可在10 min内完成。与化学法和氯化钯试验法相比，具有操作简便、耗时短、成本低等优点，检测灵敏度、回收率均达到生物检验内毒物检测的要求，可应用于CO中毒的诊断和CO中毒的法医学鉴定。
3.2中毒病人检测
临床CO中毒症状和体征比较明显，病史结台临床症状诊断准确度较高。本研究巾临床诊断80例可疑cO中毒病人55例血中检出COHb。但中毒程度的判定，尤其怀疑合并用药或病史不清伴有昏迷时COHb定量检测很有必要。所检血中COHb含量zui高的昏迷病人血中COHb达65％，10 mm内检验完毕，依照检验结果很快进钉高压氧舱治疗，24 h后病人意识恢复，各种生命体征恢复正常。
3.3 CO中毒死亡案例检测
一般认为，CO中毒死亡者血中碳氧血红蛋白含量多达60％～80％。2005年山西省部分CO中毒死亡案例死者血中COHb检出情况显示，26.2％中未检出COHb，73．.8％检出COHb。后者(124例)中COHb含量大于60％者占38．72％，50％～60％者占4l.1％，40％～50％者占7.25％，小于40％者占12 9％，而在大于50％的99例血中均未检出其他毒物，故认为血中碳氧血红蛋白含量大于50％，排除其他毒物即可诊断为CO中毒死亡。
