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液相色谱仪ODS柱物理性质对柱性能的影响

2019.12.16

影响液相色谱仪ODS柱性能的柱物理性质指标有硅胶纯度、柱尺寸、颗粒形状、粒径、表面积和孔径等。

一、硅胶纯度:

硅胶纯度指填料硅胶的纯度和残留金属离子的浓度。

A类硅胶由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属的含量高(硅羟基pKa低),导致碱性化合物发生拖尾。

B类硅胶(高纯)由于金属含量低,硅羟基pKa高,碱性化合物不发生拖尾。

二、柱尺寸:

柱尺寸指填料床的长度和内径。

短柱(15100mm):分析时间短,柱压低。

长柱(150250mm):分辨率高,分析时间长。

窄径柱(2.1mm):灵敏度高。

宽径柱(321.2mm):载样量大。

三、颗粒形状:

颗粒形状有球型和不规则型。

当使用粘度较大的流动相时,球型颗粒可降低柱压,延长色谱柱寿命。

四、粒径:

粒径指平均颗粒直径。通常为310μm

较小颗粒,柱效较高,但柱压过高。

3.5μm颗粒常用于分离复杂的多组分样品,组分单一的样品多采用5μm颗粒。

五、表面积:

表面积指颗粒外表面和内部孔表面的总和。单位为m2/g

表面积高的填料对多组分样品具有较强的保留能力、柱容量和分离度。表面积低的填料通常能迅速达到平衡,对梯度洗脱尤为重要。

六、孔径:

孔径指颗粒的孔或腔的平均尺寸。孔径范围为830nm

大孔径填料可延长大分子溶质在填料表面的滞留时间,达到充分分离,改善峰形,适用于大分子分析。


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