支原体检测试剂盒的应用

孩子感冒咳嗽老不好，吃了抗生素也没有用，小心是支原体惹的祸。

支原体与人类健康关系最为密切的有4种，即肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体与生殖支原体。其中，肺炎支原体对宝宝的危害最大，是引发肺炎的祸首之一（后三者主要引起泌尿生殖道感染），称为支原体肺炎。支原体一年四季都可侵袭宝宝，春季尤其猖獗，小自婴儿大到学龄儿童都在其觊觎之中，体弱者大多难以幸免。

培养细胞时，发现细胞增殖变慢、形态渐渐改变，是血清或培养基的问题吗？小心是支原体惹的祸。

除了危害人类健康，支原体荼毒科研也是臭名昭著。细胞污染可分为细菌、霉菌、酵母菌、支原体污染，其中支原体污染发生的概率>50%。特别是实验室和细胞工厂在细胞培养过程中，一直受到支原体污染的困惑。今天小艾带您一起揪出这危害人类健康以及荼毒科学研究的罪魁祸首——支原体。

什么是支原体

支原体又称霉形体，直径在0.1-0.3μm，是目前发现的最小的最简单的原核生物，可以轻松地通过滤膜，混入培养系统中，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分支状等多种形态。通常依附在细胞膜表面，支原体没有刚性的细胞壁，因此普通的抗生素对它根本不起作用，实验室常见的种类有：口腔支原体、精氨酸支原体、猪鼻支原体、发酵支原体、人型支原体、唾液支原体、肺支原体和梨支原体等。

支原体污染的后果

支原体污染后导致细胞生长变慢，状态变差，不会马上使细胞致死，但会影响细胞内的各种参数，如改变细胞膜抗原性，改变细胞新陈代谢，干扰核酸的合成，改变 DNA 转染效率，导致染色体畸变等。

怎么知道您的细胞正遭受支原体摧残呢，推荐以下检测方法：

• PCR法支原体检测：

GeneCopoeia PCR支原体检测试剂盒是一种快速简便的，以灵敏的PCR为基础的支原体检测试剂盒。该试剂盒包含经过优化的MycoGuard master mix、MycoGuard primer mix、超纯水和阳性对照。MycoGuard primer mix中含有的的引物可特异扩增支原体基因组中rDNA保守序列，可检测所有已知的支原体，包括细胞培养过程普遍遇到的种属，例如M. arginini、M. arthritidis、M. bovis、M. fermentans、M. genitalium、M. hominis、M. hyorhinis、M. neurolyticum、M. orale、M. pirum、M. pneumoniae、M. pulmonis、M. salivarium 和U. urealyticum，本试剂盒能检测包括以上常见支原体在内的50多种支原体。通过260bp到280bp长的PCR扩增产物，很容易识别被支原体污染的样品。

支原体检测试剂盒优势：

※ 简便

方便进行PCR反应

无需预处理细胞培养基

※ 快速

2小时即可完成检测

※ 特异性强

只扩增支原体DNA，真核细胞和细胞DNA不被扩增

G：GeneCopoeia   A：竞争公司    M：100 bp DNA marker    N：阴性对照

• 生物化学发光法

MycoGuard™检测试剂盒可快速、简单检测出细胞培养过程中存在的支原体。支原体被溶解后，释放到培养基的支原体酶与 MycoGuardTM 底物相互反应，可催化 ADP 转换为 ATP。ATP 含量的变化可通过生物发光的原理检测，由 ATP 激发的荧光强度与 ATP 浓度呈线性关系。通过计 算样本在添加底物前和添加底物后的 ATP 比率，可判断样品中是否存在支原体。

MycoGuard™检测试剂盒优势：

※ 操作时间短：半小时内即可完成实验操作及检测过程；

※ 灵敏度高：添加底物前，荧光数值稳定；添加底物后，荧光在10分钟内达到稳定的线性增长；

※ 稳定性强：在不同的孵育时间条件下，底物浓度与荧光读数的增长关系保持稳定