利用气相色谱- 质谱/质谱联用仪进行高灵敏度的...（二）

SRM 方法建立

我们使用了Thermo Scientific TSQTM 8000 GC-MS/MS 软件套件中的AutoSRM 软件进行了三重四极杆质谱方法的建立，且并未对AutoSRM 生成的方法进行任何手动修改。一个装有待分析亚硝胺化合物标准品溶液的自动进样器样品瓶专供AutoSRM 程序使用。

AutoSRM 程序自动进行以下三个步骤：

1. 首先对标准品溶液进行全扫描分析（图1.）。从全扫中得到的信号最强的离子将被作为一级离子。

2. 对上一步确定的一级离子（母离子）进行二级离子（子离子）谱图获取（可以根据分析需求设定一级离子的个数）。找出每个一级离子产生的信号最强的二级离子（可以手动选择最感兴趣的一级离子进行进

一步优化）。

表1. AutoSRM 生成的SRM 方法设置

3. 对所有化合物的选定的母离子/ 子离子对进行碰撞能的优化，以获得最大化合物响应及最佳方法灵敏度（图2）。

AutoSRM 程序能够根据需要从一个标准品样品瓶启动，完成所需的进样次数。

表1 就是由AutoSRM 自动生成的SRM 离子对表格。该表同时还显示了TSQ8000 GC-MS/MS 在Timed-SRM 模式下、在化合物洗脱时间左右用一个60 秒的短采集窗口进行采集的SRM 采集方法。无需对扫描时段进行任何其他的设置，或者说如果需要在某化合物的洗脱时间之外对其进行监测，则需要手动添加该化合物。

样品测定

在大量各种可能的亚硝胺化合物之中，本方法涵盖了那些被报道与发芽麦芽干燥的过程相关的亚硝胺化合物。被分析的样品包括未添加标样的麦芽啤酒样品，以及作为空白样的4％乙醇。如需对其他食物基质进行分析，其它化合物可以随时参照前述AutoSRM 方法建立的步骤添加至本方法中。

实验结果

本方法中包含的亚硝胺类化合物的色谱呈现了较快的流出，从7.87 的NDMA 到12.47 分，能够实现较短的循环时间并提高样品通量。图3 显示了用校准曲线中的最低浓度--1 ppb 的样品得到的峰强度。从图中可见NDMA 检测的信噪比依然很好。

图1. AutoSRM 对NDMA 从EI 全扫谱图中进行一级离子选择

图2. AutoSRM 对所有亚硝胺一级离子进行碰撞能优化

图 3. 浓度为1ppb 的标准品混合物的色谱图