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光栅扫描酶标仪杂光率低,波长准确性高

2021.9.27

光栅扫描酶标仪又称微孔板分光光度计、全波长读板机,以光栅为分光元件、以微孔板为样品载具的生化识读设备,主要用于科研领域。光栅扫描酶标仪与传统的滤光片型酶标仪相比,具有如下优势:

一、波长选择不受限制

光栅扫描酶标仪的分类方法众多,一般来说,可以分为滤光片型和光栅型两大类。总体来说,滤片技术由于发展已久,配合二向色镜(其实也就是另一模式的滤光反光滤镜)等光路系统,可以满足大部分实验的需要,是日常检验的主流。

但是滤光片型仪器由于受限于滤片的波长和数量限制,不可能满足日益增加的实验类型的检测需要,而且有时需要对物质的吸收、激发和发射光谱进行研究,所以后来就诞生了光栅型的仪器。最先推出光栅型多功能酶标仪是MD公司。

光栅扫描酶标仪的推陈出新,使得用户在波长选择上不再受限,如上海闪谱生物科技公司的SP-Max 2300A光栅型全波长酶标仪,光谱范围可达190nm-1000nm,波长任意可调,而且在杂光率、带宽控制等性能上还超越了滤光片系统。有的还可实现实现了带宽连续可调,如SP-Max 3500型多功能全波长荧光酶标仪。这些都是目前滤光片型酶标仪所不能或者较难实现的。目前,光栅型全波长酶标仪已经成为了科研主流。

二、杂光率低,波长准确性高

光栅型滤光系统俨然已经成为了目前通用性多功能酶标仪的主流,多家厂家共同努力,已经把光栅技术推到了历史新高。在光栅的众多技术参数之中,最关键的无疑就是光栅的杂光率和波长选择的准确性了。

杂光率指得就是光源通过光栅后,得到的光线中,“不需要”的波长的光占所标称波长的光的比例,表征了滤光的纯度。由于光线干涉、衍射等的复杂性,无论使用滤光片还是光栅,杂光都是不可避免的。各种滤光技术的本质就是要想办法把杂光尽可能地去掉。一般来说,滤光片型的杂光率在10-4~10-5之间,光栅型的可以做到10-6~10-7。由于此类杂光是非特异的,而且会直接进入最后的检测器,所以有多少的杂光就会引入多少的随机误差。在荧光等检测过程中,由于检测器存在放大效应,杂光率的干扰也会被指数级放大。因此,杂光率就是一个滤光系统的首要性能指标。

光栅的另一个重要指标就是波长选择的准确性。因为很多检测是依赖于物质在某个波长的特征图谱。就像DNA/RNA的OD260浓度测定,实际检测波长偏离260nm几个nm以上的话,OD值与最终浓度之间的数学关系就会发生改变。因此,一组性能优良的光栅系统,他的波长选择准确性应该是在±0.5~1nm之间。波长偏离过大有时就会影响到最终结果的准确性,而上海闪谱生物科技公司的SP-Max 3500型、SP-Max 2300A光栅型全波长扫描仪的波长选择准确性可达±0.2nm,为业界最优。

这两个参数可谓是光栅甚至滤光片滤光系统最关键的技术参数,直接影响到的是得到数据是否是真正所要测量的结果,是实验结果可靠性的最基本要求。 




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