液相色谱柱的使用和配制
液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成，其中液相色谱柱的正确安装和使用，是液相色谱工作的关键；也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。
1 液相色谱柱的使用
色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能 可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中 的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。
样品的前处理：
（a）最好使用流动相溶解样品。
（b）使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。
（c）使用0.45µm的过滤膜过滤除去微粒杂质。
2 流动相的配制
液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点：
（a）流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。
（b）流动相具有一定惰性，与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。
（c）流动相的黏度要尽量小，以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果；同时降低柱压降，延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。
3流动相流速的选择
因柱效是柱中流动相线性流速的函数，使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱，要追求最 佳柱效，最好使用最佳流速。对内径为4.6 m的色谱柱，流速一般选择1 mL/min，对于内径为4.0 mm柱，流速 0.8 mL／min为佳。当选用最佳流速时，分析时间可能延长。可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间(如使用反相柱时，可适当增加甲醇或乙腈的含量)。
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