荧光倍频峰会随荧光信号减弱而减弱吗
一般来说,扫描荧光光谱应该从波长大于激发光的波长约 5 nm 处作为扫描起点,原因有两点：1) 避免激发光的干扰；2) 从能级上来看,荧光光谱不可能在小于激发波长的位置采集到信号.因为激发光的能量决定了将分子中的电子激发至能跃迁到的最高能级,因此,从这个能级向下跃迁而发出的荧光波长不可能小于激发光的波长 (也就是说荧光的能量不可能高于激发光的能量)；另外,由于溶剂效应,会存在一定的斯托克斯位移,进而使得荧光峰进一步红移,所以更不会在小于激发光波长的位置出现荧光信号.
你提的问题中所描述的与与激发光波长相同的峰应该是瑞利散射峰,这个峰是激发光自身的光强被检测器采集到而形成的.建议你采集光谱的时候选择从波长大于激发光的波长约 5 nm 处作为扫描起点.
另外,拉曼峰一般是一个比较尖锐的,位于激发波长的长波方向的峰,通常强度比较小,除非样品的荧光很弱很弱,才可能观测到.至于倍频峰,是指的激发光频率2倍,也就是波长为激发光一半的峰.比如你用300 nm波长的光激发样品,那么在 600 nm处可能会观测到一个尖锐的峰,这就是激发光的倍频峰.
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