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20微升pcr反应体系各种反应物分别应该加多少

2023.8.01

10×扩增缓冲液2ul,4种dNTP混合物,各200umol/L 2ul,引物各10~100pmol 0.5ul,模板DNA 0.2ug,Taq DNA聚合酶0.2ul,Mg2+1.5mmol/L 1.5ul,加双或三蒸水至20ul。

PCR所用的酶主要有两种来源:Taq和Pfu,分别来自两种不同的噬热菌。其中Taq扩增效率高但易发生错配。Pfu扩增效率弱但有纠错功能。所以实际使用时根据需要必须做不同的选择。

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