关于白细胞介素检测的操作方法介绍
1.生物学活性检测
（1）促进细胞增殖和增殖抑制法：常用检测细胞增殖的方法有氚-胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）掺入法、比色法、染色法和直接计数法等，其中测定细胞代谢酶来反映细胞增殖数的比色法常用，将不同稀释度的待测样品或细胞因子标准品与培养的依赖细胞株共同培养一定时间，用酶标仪检测增殖的细胞数。前者的增殖细胞数与细胞因子的含量成正比，而后者的增殖细胞数与细胞因子的含量成反比。
（2）反向溶血空斑试验：将待测分泌白细胞介素的细胞置于单层经金黄色葡萄球菌A蛋白包被的红细胞中，抗白细胞介素抗体被金黄色葡萄球菌A蛋白固定在红细胞表面并结合待测细胞所分泌的白细胞介素。在补体存在时，白细胞介素和抗体的复合物激活补体，溶解附近的红细胞形成溶血空斑。空斑的大小与细胞分泌白细胞介素的量成正比。
2.免疫学检测
将白细胞介素作为抗原进行定量检测，通过标准品制作标准曲线，再推算样品的含量。用于白细胞介素检测的免疫学方法主要有：免疫斑点法、酶联免疫吸附（ELISA）法、放射免疫分析法、免疫印迹法、酶联免疫斑点法和反向溶血空斑试验。
3.分子生物学方法检测
主要有RNA印迹法、核酸保护分析、斑点杂交、原位杂交和逆转录聚合酶链式反应。主要通过细胞因子的基因转录mRNA的量，推断细胞因子的合成量。此法敏感度更高，但是有些细胞尽管有基因转录，但没有蛋白质表达，因此分子生物学方法并不能真实反映细胞的分泌状态，不能完全替代生物学方法或免疫学方法。
4.细胞内白细胞介素的检测
可采用流式细胞术免疫荧光技术，即从单细胞水平检测细胞因子，更确切地反映了不同细胞或细胞亚群产生细胞因子的能力，用多色标记的荧光抗体可在一种细胞内同时测定多种不同的细胞因子。
推荐
