3-磷酸甘油醛脱氢酶的测定实验——还原反应

3-磷酸甘油酸激酶

三乙醇胺-NaOH3-磷酸甘油酸ATPNADHEDTA硫酸镁

分光光度计

实验所需「试剂」具体见「其他」

0.98 ml 实验混合物

0.02 ml 酶溶液

25℃ 时，于 340 nm 处吸收值降低。NADPH 的吸收系数 ε₃₄₀＝6.3×10³ l/（mol·cm）。

试剂：

0.1 mol/L 三乙醇胺-NaOH pH 7.6（三乙醇胺-HCl，Mr＝185.7；溶解 18.6 g 于 800 ml H₂O 中，用 1 mol/L NaOH 调节至 pH 7.6，补充到 1 L）

0.1 mol/L 3-磷酸甘油酸（3-磷酸甘油酸，二氢盐，Mr＝230.0；230 mg 溶于 10 ml 水中）

0.1 mol/L ATP（二钠盐，三水合物，Mr＝605.2；605 mg 溶于 10 ml 水中）

0.01 mol/L NADH（二钠盐，Mr＝709.4；71 mg 溶于 10 ml 水中）

0.1 mol/L EDTA（Mr＝292.2；292 mg 溶于 10 ml 水中）

0.1 mol/L 硫酸镁（MgSO₄ · 7H₂O，Mr＝246.5；247 mg 溶于 10 ml 水中）

3-磷酸甘油酸激酶，从酵母中提取（约 2000 U/mg）